贫血是世界范围内常见的疾病之一。据WHO最新资料统计,全世界贫血人数约有30亿,其中育龄妇女约占10%-20%。此外,孕妇一旦发生贫血,在妊娠和分娩时死亡的危险性将增加5倍,同时发生早产、胎儿畸形和体重偏低的可能性也会升高。因此,贫血已成为全球关注的公共卫生问题。本文研究的富马酸亚铁叶酸分散片是一种抗贫血药物新制剂,属国家3.2类新药,其中亚铁与叶酸的比例(150：1)为WHO最新推荐的补充亚铁与叶酸的最佳比例。迄今为止,国内外未见该比例的亚铁与叶酸组合及其分散片的研究报道和相关产品上市,仅见本课题组申请并公开的“富马酸亚铁叶酸分散片及其制备方法”发明专利(CN101669954)。作者按照2007年国家食品药品监督管理局第28号令《药品注册管理办法》中“化学药品注册分类及申报资料要求”,对其进行了临床前的处方工艺、质量标准、急性毒性、一般药理学、药代动力学与生物利用度等研究,旨在为富马酸亚铁叶酸分散片的临床试验和新药注册积累资料。第一部分,富马酸亚铁叶酸分散片处方工艺研究。通过单因素试验和正交试验,以崩解时限、分散均匀性、脆碎度为指标,对富马酸亚铁叶酸分散片的辅料种类和用量进行了筛选。结果最优处方为：富马酸亚铁和叶酸共占54%(亚铁：叶酸=150：1),填充剂微晶纤维素占30%,崩解剂聚乙烯吡咯烷酮占8%,表面活性剂十二烷基硫酸钠占1.5%,粘合剂PVP-K30占4%,助流剂微粉硅胶占1%,润滑剂硬脂酸镁占0.5%,矫味剂甜菊素占1%。采用湿法制粒压片工艺制备分散片,具有工艺简单、生产成本低等优点,适合工业化生产。第二部分,富马酸亚铁叶酸分散片质量标准研究。HPLC法测定富马酸亚铁叶酸分散片中叶酸含量、有关物质及溶出度,硫酸铈滴定法测定富马酸亚铁含量。HPLC法色谱条件：色谱柱为岛津Shim-pack VP-ODS (250mm×4.6mm),流动相为CH3OH:KH2PO4缓冲液(pH：6.3)=20：80,流速为1mL/min,检测波长为277 nm,进样量为20μL。在此条件下,叶酸与各杂质峰分离良好,理论塔板数按叶酸峰计算不低于3000,分离度大于1.5。该方法高效、简单、专属性强,其灵敏度、回收率和重现性均较好。性状为棕黄色圆形片剂；鉴别反应灵敏；富马酸亚铁和叶酸的含量分别为标示量的99.13%和99.24%,叶酸的有关物质含量小于1%,高铁盐含量小于5%；15分钟累积溶出率达80%以上且溶出均匀,含量均匀度和分散均匀性检查均符合要求。参照新药指导原则以及2005版《中国药典》二部附录要求,最终拟定了富马酸亚铁叶酸分散片的质量标准草案。第三部分,富马酸亚铁叶酸分散片急性毒性试验。采用改良寇氏法测定了该分散片的LD50。首先通过预试获得0%与100%小鼠死亡的剂量范围,分别为912mg/kg、3832mg/kg；再以各剂量组间的公比为r=1.25进行正式试验,给药后即刻观察动物反应情况,并定时观察7天,记录给药后的毒性症状及死亡情况,按改良寇氏法公式计算LD50和95%可信限。结果,富马酸亚铁叶酸分散片的LD50和95%可信限分别为2137.5mg/kg、19723～2316.5mg/kg,其LD50值相当于成人口服该药剂量的712.5倍,显示该分散片的毒性极小。第四部分,富马酸亚铁叶酸分散片一般药理学研究。以富马酸亚铁叶酸分散片LD50的1/20、1/10、1/5作为低、中、高三种给药剂量,测定其对小鼠自主活动、协调功能、戊巴比妥钠阈下剂量及阈剂量催眠作用以及对大鼠血压、心率和呼吸频率等的影响。结果,富马酸亚铁叶酸分散片低、中、高三种剂量对小鼠的自主活动、协调功能未见明显影响(P>0.05),对戊巴比妥钠阈下剂量、阈剂量的催眠作用未见协同作用(P>0.05)；对大鼠血压、心率和呼吸频率均未见明显影响(P>0.05)。第五部分,富马酸亚铁叶酸分散片药代动力学与生物利用度研究。采用原子吸收分光光度法测定血浆铁浓度,运用WinNonlin5.2.1药代动力学软件处理血药浓度数据。以家兔为模型动物,自制的富马酸亚铁叶酸普通片为参比制剂,设计二制剂二周期交叉试验,考察富马酸亚铁叶酸分散片在家兔体内的药代动力学特征,并比较其分散片与普通片的相对生物利用度。结果,富马酸亚铁叶酸分散片的Cmax为(10.36±0.64)μg/mL,Tmax为(0.79±0.10)min,AUC(121.15±10.26)μg/mL-h；富马酸亚铁叶酸普通片的Cmax为(8.95±0.48)μg/mL,Tmax为(1.33±0.52)min,AUC为(110.21±15.56)μg/mL·h；富马酸亚铁叶酸分散片的相对生物利用度为108.56%。经统计分析,富马酸亚铁叶酸分散片的达峰浓度较普通片显著增加(P<0.05),达峰时间较普通片显著提前(P<0.05),达到了富马酸亚铁叶酸分散片起效快、血药浓度高的设计要求。