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本论文主要完成了以下工作:
(1)用电化学方法研究了槲皮素与鲑鱼精DNA的相互作用,确定了配合物与DNA的作用方式为静电作用。以槲皮素为杂交指示剂,利用共价键合法制备了DNA修饰玻碳电极并制成了DNA电化学传感器,能有效识别与探针ssDNA互补的ssDNA片断,具有良好的选择性和灵敏性,检测靶ssDNA的线性范围为4.90×10-8~2.43×10-7mol·L-1,检测限为1.32×10-8mol·L-1。
(2)合成了芦丁铜(Ⅱ)化合物(C81H86Cu2O48,简写为(3R-4H)Cu2,R代表芦丁),通过元素分析和红外光谱法对其进行了表征并确定了其结构。通过循环伏安法和荧光分析法研究了(3R-4H)Cu2与鲑鱼精DNA的相互作用。结果表明(3R-4H)Cu2通过嵌插作用与DNA结合,与DNA的每个碱基对作用的键合位点数为1,键合常数为1.99×106L.mol-1。以(3R-4H)Cu2作为杂交指示剂,利用共价键合法制备了ssDNA修饰玻碳电极并制成了DNA电化学传感器,能有效识别与探针ssDNA互补的ssDNA片断,具有良好的选择性,检测靶ssDNA的线性范围为1.62×10-8~8.10×10-7~mol·L-1,检测限为2.3×10-9mol.L-1。
(3)合成了芦丁锰(Ⅱ)(C54H58MnO32,简写为(2R-2H)Mn,R代表芦丁),通过元素分析和红外光谱法对其进行了表征并确定了其结构。并通过循环伏安法和荧光分析法研究了(2R-2H)Mn与鲑鱼精DNA的相互作用。结果表明(2R-2H)Mn通过嵌插作用与DNA结合,与DNA的每个碱基对作用的键合位点数为1,键合常数为2.22×104L·mol-1。用带有羧基的多壁碳纳米管(MWCNTs-COOH)修饰玻碳电极,将5端氨基修饰的核苷酸通过羧基共价固定在碳纳米管上,电活性的(2R-2H)Mn作为杂交指示剂,制备了一种新颖、灵敏的DNA电化学传感器。与将ssDNA直接固定在玻碳电极上的DNA电化学传感器相比,由于碳纳米管有大的表面积,好的电子转移特性,增加了探针ssDNA的固定量,检测靶ssDNA的灵敏度大大提高。该传感器检测靶ssDNA的线性范围为1.60×10-9~4.80×10-8mol·L-1,检测限为1.0×10-9mol.L-1。