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目的：应用RNA干扰技术,通过构建针对人VCAM-1的慢病毒载体并转染人口腔鳞癌HN12细胞株,研究其对口腔鳞癌HN12细胞中VCAM-1基因表达的影响及抑制口腔鳞癌HN12细胞增殖情况,初步探讨下调VCAM-1基因抑制口腔鳞癌细胞增殖的分子机制,为口腔鳞癌的靶向基因治疗提供新途径。方法：1.构建四组人VCAM-1-shRNA慢病毒载体。针对人VCAM-1设计四组siRNA序列,BamHI和EcoRI进行载体质粒双酶切后连接入RNA干扰载体质粒pLVX-shRNA-GFP中,经PCR和DNA测序鉴定重组克隆的准确性。将正确的重组病毒质粒及辅助包装载体质粒共转染293T细胞,收集细胞培养上清液,浓缩后测定病毒滴度,并进行病毒包装。2. VCAM-1-shRNA慢病毒载体对HN12细胞体外增殖的抑制作用。实验设立空载体组为实验对照组(NC)和未转染组为空白对照组(CK),应用VCAM-1-shRNA慢病毒转染HN12细胞,荧光显微镜下观察并计算VCAM-1-shRNA;漫病毒转染效率,探索HN12细胞体外最佳转染复数。采用RT-PCR和Western-blot技术分别检测HN12中VCAM-1的mRNA和蛋白水平的敲减效率,CCK8法检测HN12细胞的生长情况。结果：1.RT-PCR和DNA测序鉴定重组克隆结果显示,成功构建了人VCAM-1-shRNA慢病毒载体：分别命名Target1、Target2、Target3、Target4,滴度分别为6.0×109 TU/ml、1.0×109 TU/ml、1.0×109 TU/ml、5.0×109 TU/ml。2.将各组VCAM-1-shRNA慢病毒转染HN12细胞,转染72小时后检测其VCAM-1mRNA抑制率分别为85.53%、70.57%、72.98%、34.03%;VCAM-1蛋白表达量亦明显下降,而内参B-action表达未受影响；CCK8检测表明细胞生长受到抑制。结论：本实验成功构建了靶向VCAM-1基因的重组慢病毒载体VCAM-1-RNAi,并利用其将VCAM-1小干扰RNA表达框架转导入HN12细胞,并在细胞内实现表达,实现了靶向VCAM-1基因的RNA干扰。通过本实验中VCAM-1-shRNA慢病毒载体有效地下了HN12中VCAM-1 mRNA及蛋白量的表达,从而抑制了HN12细胞的生长；进一步验证了VCAM-1在口腔鳞癌HN12细胞株的生长过程中可能起到肿瘤促进因子的作用,下调VCAM-1的表达可以成为治疗口腔鳞癌的治疗方法之一。