【摘 要】
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目的:通过卵清蛋白致敏及卵清蛋白雾化激发构建寒性哮喘大鼠模型,使用平喘宁方对寒性哮喘大鼠进行干预,观察其对大鼠气道炎症的作用,并初步探讨平喘宁对PI3K-Akt/PKB信号通路中相应蛋白产生的影响,进而研究平喘宁方对哮喘气道重塑的有关机制。方法:将105只周龄在6周左右的(SPF级)健康的SD雄性大鼠,用随机数字表法分为七组,分别为正常组、模型组、平喘宁高、中、低剂量组、桂龙咳喘宁组及地塞米松组,
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目的:通过卵清蛋白致敏及卵清蛋白雾化激发构建寒性哮喘大鼠模型,使用平喘宁方对寒性哮喘大鼠进行干预,观察其对大鼠气道炎症的作用,并初步探讨平喘宁对PI3K-Akt/PKB信号通路中相应蛋白产生的影响,进而研究平喘宁方对哮喘气道重塑的有关机制。方法:将105只周龄在6周左右的(SPF级)健康的SD雄性大鼠,用随机数字表法分为七组,分别为正常组、模型组、平喘宁高、中、低剂量组、桂龙咳喘宁组及地塞米松组,每组15只。适应性喂养后的第1天及8天对哮喘六组大鼠腹腔注射10%卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)1ml(与生理盐水按10%的浓度溶解而成)致敏,第15天开始以1%OVA超声雾化激发,每次30分钟,1次/天;同时将大鼠放置于可控温度的寒冷箱中(0-2℃),每次30分钟,1次/天,连续7天。空白对照组大鼠参照上述方法,但致敏与激发时均以生理盐水代替OVA。寒性哮喘大鼠模型建立成功后,从第22天开始,按照成人剂量换算大鼠等效剂量,连续给予相应药物对大鼠进行灌胃治疗,1次/天,连续28天。造模过程中观察大鼠一般情况变化,记录体重,死亡情况。干预结束后取材,使用HE染色法观察肺组织切片中炎症细胞浸润程度、平滑肌变化等病理改变并进行评价;Western blot法检测大鼠p110、PTEN以及PIP3蛋白在肺组织中的表达;免疫组化法检测PDK1、GSK3在肺组织中的表达量。结果:1各组大鼠肺组织病理学改变:正常组大鼠肺组织气道结构完整,支气管管腔光滑,气道及周围血管组织无明显炎症细胞浸润,平滑肌形态结构正常;平喘宁组与地塞米松组肺组织病理学结果较模型组轻,肺组织结构较完整,周围可见少量炎症细胞浸润,支气管挛缩较少,无平滑肌增厚,支气管管腔接近正常;桂龙咳喘宁组亦有病理改善,但低于地塞米松组。2模型组大鼠肺组织PDK1表达量较正常组显著上升(P<0.01),GSK3β表达量较正常组明显下降(P<0.01);与模型组相比,平喘宁高、中剂量组PDK1表达量明显下降(P<0.01),GSK3β表达量显著上调(P<0.01)。3与正常组比较,模型组大鼠肺组织中p110α蛋白、PIP3蛋白表达量明显增强(P<0.01),PTEN蛋白表达量明显减弱(P<0.01);与模型组相比较,平喘宁高、中剂量组大鼠肺组织中p110α蛋白、PIP3蛋白表达量显著下调(P<0.01),PTEN蛋白表达量上调(P<0.05)。结论:1平喘宁可减少哮喘大鼠支气管及周围炎性细胞浸润,管壁破坏情况得到修复,管腔内黏液栓减少,支气管平滑肌增生情况得到改善,支气管管壁增厚状况的到缓解,气道狭窄亦得到改善。2平喘宁能通过调控PI3K-Akt信号转导通路中的GSK3、PDK1与p110、PTEN、PIP3,缓解气道炎症、减轻气道重塑。
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