Survivin在肾癌组织中的表达及Survivin反义寡核苷酸诱导肾癌细胞凋亡及机制的研究

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前言 肿瘤是一类细胞增殖周期紊乱性疾病,细胞增殖和凋亡的失衡可以导致肿瘤的发生和发展,对细胞周期的调控在肿瘤的发生和治疗中起重要作用。不可控制的细胞增殖是癌症的特征。恶性肿瘤的增殖从生物学角度看主要表现在两个方面:一方面是肿瘤细胞的“不灭性”,即凋亡障碍;另一方面是细胞分裂的失控,即细胞周期网络调控系统的障碍。Survivin是近来分离的哺乳动物凋亡抑制剂,具有与其他凋亡基因不一样的特性,即在良好分化的正常组织中不表达,但是广泛表达于各种肿瘤组织。它在肿瘤中高表达反映了凋亡抑制在肿瘤进展中的作用,而它在有丝分裂中的作用引起了人们对于细胞增殖和细胞凋亡的兴趣。 目的 通过免疫组化和RT-PCR方法检测了Survivin在肾癌组织和肾癌细胞系中的表达情况,通过反义寡核苷酸技术,观察了其对肾癌细胞凋亡的影响,探讨其对肿瘤细胞影响的途径。 方法:(1)应用免疫组化方法检测66例肾癌患者和20例正常肾组织中Survivin的表达情况,应用RT-PCR和Western blot检测6例肾癌组织,6例正常肾组织及两种肾癌细胞系786-0和ACHN中Survivin mRNA的表达情况。(2)通过脂质体介导的Survivin反义寡核苷酸技术,采用电镜,免疫组化,western blot,RT-PCR和流式细胞仪等手段,观察Survivin反义寡核苷酸对肾癌细胞凋亡、增殖的影响。
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