【摘 要】
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糖肽类抗生素是治疗各种细菌感染的有效方法。替考拉宁和雷莫拉宁是临床中经常使用和研究的两种糖肽类抗生素。它们可用于治疗各种严重的革兰氏阳性细菌感染,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染和耐万古霉素的艰难梭菌感染。由于它们具有良好的抑菌效果,可能在水产养殖中会被用于细菌感染的预防及治疗。其中,国内外已经有部分糖肽类抗生素在畜禽等食品动物中有使用且在对应食品中有检出。此外,它们也可能通过制药废水、医疗废水
【基金项目】
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国家重点研发计划（项目编号:2017YFC1600700）“中国-东盟海上合作基金项目”；
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糖肽类抗生素是治疗各种细菌感染的有效方法。替考拉宁和雷莫拉宁是临床中经常使用和研究的两种糖肽类抗生素。它们可用于治疗各种严重的革兰氏阳性细菌感染,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染和耐万古霉素的艰难梭菌感染。由于它们具有良好的抑菌效果,可能在水产养殖中会被用于细菌感染的预防及治疗。其中,国内外已经有部分糖肽类抗生素在畜禽等食品动物中有使用且在对应食品中有检出。此外,它们也可能通过制药废水、医疗废水等间接途径污染水产养殖环境。因此,水产养殖环境及水产品中存在残留的风险,迫切需要建立环境水体及水产品中替考拉宁与雷莫拉宁的检测方法,为政府监管和风险评估提供技术支撑。本论文采用级联洗脱技术结合高效液相色谱串联质谱建立了一种简单、灵敏、稳定的测定环境水体中替考拉宁和雷莫拉宁七种活性成分的检测方法。使用C18色谱柱分离,以0.1%甲酸乙腈和0.1%甲酸水为两种流动相,进行梯度洗脱,多反应监测模式（MRM）进行测定,内标法定量。样品经玻璃微纤维膜过滤后采用HLB固相萃取柱进行富集,针对七种极性不同的目标物,采用级联洗脱技术根据相似相溶原理分别洗脱,使用甲醇先洗脱出TA2-1,TA2-2,TA2-3,TA2-4和TA2-5,然后使用酸化的甲醇水溶液洗脱出RA2和TA3-1。在优化条件下,该方法在1.0 ng/L～100.0 ng/L范围内目标物的相关系数（R2）均大于等于0.998。目标物的日内与日间精密度均小于3.0%,通过对两种不同的基质样品（河水与近海岸海水）分别进行低（定量限）、中（5倍定量限）和高（10倍定量限）三个浓度水平的基质加标,目标物的回收率范围为86.0%～114.5%。该方法的检出限和定量限分别为0.1 ng/L～1.3 ng/L和为3.0 ng/L～4.0 ng/L。该方法成功应用于养殖池塘水等40个多种类型的水样中替考拉宁和雷莫拉宁的分析测定,在其中的一个样品中检出TA2-2,3,浓度为8.0 ng/L。本研究成功建立了多种不同极性化合物同步洗脱的样品前处理方法,实现了环境水体中替考拉宁和雷莫拉宁七种痕量成分的同时测定。本论文采用改良Qu ECh ERS技术萃取净化结合高效液相色谱串联质谱检测,建立了水产品中痕量替考拉宁和雷莫拉宁的测定方法。实验优化了提取剂种类,提取溶剂体积,净化剂种类以及净化剂用量来确定最佳的样品前处理条件。实验采用新型绿色吸附剂-壳聚糖作为Qu ECh ERS净化剂,与传统的净化剂PSA,C18和GCB进行比较,来评价其对复杂水产品基质中糖肽类抗生素替考拉宁和雷莫拉宁的净化能力。相比于PSA、C18和GCB,壳聚糖对目标物具有相对较好的净化能力（回收率为90.3%～93.5%）,净化能力略强于PSA（回收率为79.8%～87.2%）,其净化能力大小为:壳聚糖＞PSA＞C18＞GCB。此外,壳聚糖来源于天然的虾壳、蟹壳等废弃资源,是一种绿色的,可再生的,可生物降解的材料。因此,壳聚糖对复杂的水产品基质具有良好的净化能力,是一种富有潜力的Qu ECh ERS净化剂。在最佳条件下,所有目标物的检出限和定量限范围分别为0.4μg/kg～0.8μg/kg和1.0μg/kg～3.0μg/kg,在1 ng/m L～100 ng/m L之间的线性相关系数值大于等于0.998。对九种水产品（包括鱼、虾、蟹等）进行低、中、高三个浓度水平的加标回收实验,该方法的回收率范围为89.8%～110.0%,日内日间精密度小于7.2%。在鲤鱼、罗非鱼、草鱼、鲢鱼、鳙鱼、大菱鲆、对虾、海参和鳗鲡水产品样品中,该方法的基质效应在-2.6%～-18.5%之间,小于±20%,基质效应均低。该方法成功地应用于随机抽取的90个多种类型的水产品中,目标物均未检出。选取几种空白样品进行低浓度加标实验（3.0μg/kg）,所有样品的回收率在90.0%～106.8%之间,RSD范围为0.9%～5.6%。结果表明该方法绿色、经济、灵敏、高效、准确、可靠,可实现大批量样品的快速测定及水产品中替考拉宁和雷莫拉宁残留监测。
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