KSHV亚型分析及HCMV重组抗原构建

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:peng23
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卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposis sarcoma-associated herpesvirus,KSHV),又称为人疱疹病毒8型(Human herpesvirus-8),是卡波氏肉瘤(Kaposis sarcoma,KS)、原发性渗出性淋巴瘤(Primary effusion lymphoma,PEL)及多中心卡氏病(Multicentric Castlemans disease,MCD)的病原体。KSHV在世界范围内的传播被认为与人类的迁徙有重要关联,我国新疆地区是KSHV的主要流行区域。   本文对我国新疆地区KS患者中提取的KSHV基因进行了亚型分析。实验采集KS患者组织共28份,成功提取到KSHV基因组,通过巢式PCR技术成功扩增到363bp的K1基因片段,对其进行测序及构建进化树分析,发现23例A亚型及5例C亚型。成功对15个样品进行了K15亚型的分析,其中P亚型4例,M亚型11例。人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV),又称为人疱疹病毒5型(Human Herpesvirus5,HHV5);在免疫力低下的人群中,HCMV是引起机会感染的重要病原体,并可诱发相应严重疾病,甚至死亡。本实验选用HCMV的UL32、UL44、UL55、UL83、UL123基因中抗原性强且具有较高亲水性片段构建HCMV融合抗原表达质粒。质粒编码723个HCMV抗原氨基酸残基,经诱导表达后,成功表达于大肠杆菌BL21(DE3)的上清。更昔洛韦(Ganciclovir,GCV)是传统的抗DNA病毒药物,临床发现其对肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)引起的病灶有一定治疗效果。实验研究发现GCV仅在EV71感染Vero细胞初期,表现出对EV71病变形成有一定抑制作用,当EV71进入复制周期后,GCV无法其基因复制,病毒颗粒组装及释放。
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