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研究背景:抑郁症是综合多种因素作用引发的,且具有遗传倾向的慢性心理疾病,其主要临床症状为情绪低落或者悲观自责、兴趣缺失、有负罪感或无价值感,躯体症状可表现为睡眠紊乱、食欲减退、活动减少或注意力下降等,病程时间长且容易反复发作,对人们的身体及精神带来极大的伤害,已经成为21世纪的流行病。但其具体的发病机制并不十分清楚。近年来,越来越多的研究者们关注免疫系统之间的关系在抑郁症中的作用。有研究表明,抑郁症的发病机制之一是细胞因子引起的免疫功能紊乱,抑郁症患者细胞免疫功能和免疫细胞数目会发生改变。因此,细胞因子也逐步成为抑郁症研究的热点。流行病学调查显示,疼痛和抑郁之间存在密切相关性,抑郁人群的疼痛发生率和疼痛人群发生率均高于各自单发生率,疼痛和抑郁的共患率平均为50%-60%。其中,抑郁和焦虑在人群中发病率为16%左右,但在慢性痛患者中有着更高的发病率约为35%。疼痛和抑郁常常共病,两者经常交叉重叠,共存时患者功能损害更大,生活质量更差。因此,治疗慢性病理性疼痛伴随抑郁的共病问题迫在眉睫。因此本文主要是通过蜜蜂毒引发慢性疼痛,进一步诱导抑郁的模型,来探讨抑郁症的发病机制,从而寻找抗抑郁治疗的策略,进而为临床进行抗抑郁治疗提供理论基础。研究目的:1.探讨免疫功能细胞因子MMP-2、MCP-1、E-Seletin、Aopps与老年抑郁症之间的关系2.探讨PAK-ERK/p38 MAPK信号通路和抑郁之间的相关性关系研究方法:根据标准严格选取86例老年抑郁症患者与86例正常老年人。实验分为三组:正常组、抑郁症患者治疗前组、抑郁症治疗后组。所有人员均在清晨,空腹时收集静脉血。运用Western-blot蛋白印迹法检测MMP-2和MCP-1表达,ELISA和分光度计法检测E-selectin水平及AOPPs浓度变化。清洁级成年Spragure-Dawley(SD)大鼠,大鼠抑郁模型建立为:足底给予蜜蜂毒注射,建立蜜蜂毒疼痛诱发抑郁模型。随机分为以下三组:1.正常对照组(control):在大鼠足底,我们注射50ml的0.9%的生理盐水,2小时后,在鞘内注射5ml的生理盐水;2.蜜蜂毒模型组(BV+Veh):大鼠足底,我们注射50ml的蜜蜂毒,浓度为4mg/ml,2小时后鞘内注射5ml的生理盐水;3.药物处理组(BV+SB):大鼠足底注射50ml的蜜蜂毒,2小时候鞘内注射5ml的SB203580,其浓度为1mg/ml。快速断头取新鲜脊髓组织,提取蛋白质,通过western blot方法检测p21活化激酶(p21-activated kinase,PAK)、p38、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-refulated kinase,ERK)的磷酸化水平。研究结果:1.免疫印迹的结果发现,与正常对照组相比,老年抑郁症组MMP-2、MCP-1表达升高,口服帕罗西汀14天后,其血清中MMP-2、MCP-1含量显著降低。2.ELISA方法检测血清中E-selectin水平及AOPPs水平发现,与正常对照组相比,抑郁症患者血清中E-seletin及AOPPs含明显增加。当给予口服帕罗西汀治疗后,其水平显著降低。3.研究发现,足底给予蜜蜂毒注射后,大鼠脊髓组织内PAK磷酸化水平升高,而当给予P38 MAPK信号通路抑制剂SB203580处理后,显著降低PAK的磷酸化水平。4.免疫印迹结果发现,大鼠足底给予蜜蜂毒注射处理后,p38磷酸化水平增加,提示,蜜蜂毒可激活p38活性。当给予其抑制剂SB203580处理后,可显著降低p38的磷酸化水平。各组总p38的含量无明显变化,表明,SB203580处理不影响总p38的表达。5.蛋白电泳可见,各组之间总ERK1/2的含量无明显变化,表明SB203580不影响脊髓ERK1/2的表达。与正常对照组相比,蜜蜂毒足底注射后显著上调ERK的磷酸化水平,提示,蜜蜂毒诱导的抑郁可增强ERK信号通路。值得指出的是:给予SB203580处理后,可显著下调ERK的磷酸化水平。研究结论:1.老年抑郁症发生后,免疫功能相关细胞因子激活;2.慢性痛激活P38 MAPK信号通路,可能诱导抑郁症的发生。