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研究背景:吉西他滨是一种新型抗嘧啶核苷酸代谢化疗药物,具有抗瘤谱广、作用机制独特、毒性反应低、与其他化疗药物无交叉耐药且毒性反应无叠加等特点。体外研究、动物实验及临床试验均表明它对多种实体瘤具有良好的抗肿瘤活性,近年来已被大量应用于晚期膀胱癌的化疗。其良好的临床价值已得到充分肯定,以其为基础的联合化疗已成为临床研究的热点问题。研究表明维生素K3和多种化疗药物联用时可增强化疗药物的抗肿瘤活性。目前将维生素K3与一线化疗药物联用已成为研究的热点,维生素K3与吉西他滨联用的研究尚不多见。本研究初步探讨了维生素K3与吉西他滨联用对人膀胱癌T24细胞株细胞凋亡的影响。目的:研究维生素K3(VK3)与吉西他滨联用对人膀胱癌T24细胞株细胞凋亡及细胞周期的作用。方法:⑴用噻唑蓝(MTT)法筛选出一定浓度梯度的吉西他滨(0.01,0.1,1.0,10.0μg/ml)作用于人膀胱癌T24细胞株72h后的最低有效浓度。⑵用筛选出的最低有效浓度的吉西他滨联合一定浓度梯度的VK3(2,5,10,20μmol/L),作用于人膀胱癌T24细胞株72h后,用MTT法筛选出联合用药的最低有效浓度。⑶分组并培养各组细胞:空白对照组,最低有效浓度的吉西他滨组,最低有效浓度的联合用药组。⑷用碘化丙啶(PI)流式细胞术观察上述三组的细胞凋亡情况,通过流式软件FACS分析细胞周期变化。⑸显微镜下观察各组细胞形态的变化。结果:⑴用MTT法筛选出吉西他滨作用于T24细胞株72h后的最低有效浓度为1.0μg/ml。⑵用MTT法筛选出联合用药的最低有效浓度为1.0μg/ml吉西他滨+10μmol/L VK3。⑶流式细胞仪检测各组细胞凋亡率结果示:1.0μg/ml吉西他滨+10μmol/LVK3组与1.0μg/ml吉西他滨组相比,细胞凋亡率增高,差异有统计学意义(P<0.05)。⑷流式细胞仪检测各组细胞周期示:1.0μg/ml吉西他滨+10μmol/L VK3组与1.0μg/ml吉西他滨组相比,细胞周期的S期阻滞增高,差异有统计学意义(P<0.05)。⑸显微镜下观察示:1.0μg/ml吉西他滨+10μmol/L VK3组与1.0μg/ml吉西他滨组相比,细胞数量减少,细胞坏死增多。结论:VK3可增强吉西他滨诱导人膀胱癌T24细胞株凋亡的作用,其机制可能与VK3增强了吉西他滨的细胞周期的S期(DNA合成期)阻滞有关,具体机制仍需进一步研究。