背景和目的 骨肉瘤是一种临床常见的成骨性恶性肿瘤，约占所有骨肿瘤的20％。其恶性程度高，好发于青少年。由于80％的患者在就诊时即已经发生转移，20％-30％的患者无论采取何种治疗，预后均极为不佳，近30年来，骨肉瘤的总体疗效相对上世纪80年代并无很大的提高。如何进一步提高恶性骨肿瘤患者的疗效和生存率，仍是临床亟待解决的重要课题。 大量研究表明人类多种肿瘤细胞和体外培养的肿瘤细胞都可产生VEGF(vascular endothlial growth factor，VEGF)，多种肿瘤组织VEGF表达也明显高于其来源的正常组织，肿瘤组织VEGF表达水平与肿瘤血管化程度，恶性度呈正相关。血管内皮生长因子(VEGF)是一种重要的促血管形成因子，通过增加微血管的通透性和特异性的与血管内皮细胞受体结合，促进血管内皮细胞的分裂和增殖，进而导致新生血管的生成，具有促血管形成和增加血管通透性的双重功能，在肿瘤的发展、转移及预后等方面均起着重要的作用。 因此如何有效的抑制VEGF的表达是肿瘤治疗的关键所在。目前研究较多的有抗VEGF及VEGFR的单克隆抗体，反义寡核苷酸片段等，但效果不甚理想。近几年来兴起的RNA干扰技术，为肿瘤的分子生物治疗开辟了新的途径。与传统基因沉默技术相比，具有效果强、持续时间长等优势，目前这一技术已在肿瘤的基因治疗方面显示出诱人的前景。为此本实验设计并构建了针对VEGF的siRNA表达载体，转染入人骨肉瘤细胞系MG-63观察其对细胞VEGF表达的沉默效应。 方法