油茶枯乙酸乙酯、正丁醇部位化学成分的分离与抗炎活性研究

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油茶(Camellia oleifera Abel.)是一种多年生木本油料作物,主要分布在广西、湖南、江西等南方地区,其种子常用来榨取茶油,油茶籽榨取油茶籽油之后的残渣即为油茶枯。本论文对油茶枯乙醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇萃取部分进行分离,通过运用硅胶柱层析、中低压制备色谱、半制备制高效液相色谱、重结晶等方法分离得到22个化合物,并根据光谱数据鉴定了它们的结构,还对其中部分化合物进行了抗炎活性的测试。本论文主要由3部分组成,第一部分是文献综述,主要概述油茶枯的化学成分与生物活性研究进展。第二部分是化学成分的分离与鉴定,对油茶枯乙醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇萃取部分化学成分进行分离及鉴定工作。第三部分是部分化合物的抗炎活性研究。本论文采用植物化学和波谱学相结合的技术,从油茶枯乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇部位分离并鉴定了 22个化合物的结构。它们分别是:月桂酸(1)、棕榈酸(2)、异香草酸(3)、3,4-二羟基苯甲酸乙酯(4)、没食子酸甲酯(5)、四-乙烯基苯甲醛(6)、原儿茶酸(7)、没食子酸乙酯(8)、3β,12-双羟基-11,22-二酮-12-乙烯基-24羧酸(9)、没食子酸(10)、对羟基苯甲酸(11)、2-(3’,4’-二羟苯基)-1,3-胡椒环-5-醛(12)、槲皮素(13)、β-谷甾醇(14)、山奈酚(15)、豆甾醇(16)、齐墩果酸(17)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(18)、山奈酚-3-O-[2-O-β-D-半乳糖-6-O-α-L-鼠李糖]-β-D-葡萄糖苷(19)、山奈酚3-O-α-L-鼠李糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(20)、山奈酚3-O-[2-O-β-D-木糖-6-O-α-L-鼠李糖]-β-D-葡萄糖苷(21)、芦丁(22)。其中化合物(4)、(8)、(9)、(12)、(18)是首次从油茶枯中分离得到。建立脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导巨噬细胞RAW264.7产生炎症的细胞筛选模型,检测其一氧化氮(NO)积累量评价其抗炎活性。结果发现酚酸类和黄酮类化合物均可显著抑制NO在细胞内的产量,说明两者均具有较好的抗炎效果。根据文献调查发现油茶枯中黄酮类化合物的含量远高于酚酸类化合物,且黄酮类化合物以山奈酚类为主要成分。随之我们对山奈酚类化合物进行了更加深入的研究。检测细胞内重要的炎症因子PGE2的含量以及诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)和核转录因子NF-κB相关蛋白的表达量。结果发现油茶枯中的山奈酚类化合物能抑制RAW 264.7细胞中NF-κB的活性,下调诱导型诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)的表达,对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞RAW 264.7产生NO和PGE2等炎症介质具有非常显著的抑制作用。以上研究结果表明,油茶枯中的山奈酚类化合物可作为炎症介质或因子的抑制剂而抗炎药物的开发上具有良好发展前景。本论文通过油茶枯乙醇提取物乙酸乙酯、正丁醇部位化学成分的系统分离、结构鉴定与药理活性研究,旨在为油茶枯的深度研究与综合开发利用提供一定的科学理论指导和实验依据。
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