随着经济社会的发展，在缺乏有效环境保护政策约束下，人类活动对自然环境造成的破坏和影响加剧，生态系统变得十分脆弱，保护生态环境和生物资源的需求越来越强烈，作为保护生物多样性的重要手段，建立自然保护区成为世界各国保护生态环境的重要举措。广东肇庆的鼎湖山自然保护区作为1956年成立的我国第一个自然保护区，在市场经济发展的环境下，开始开展生态旅游活动，自然保护区的利益主体呈现出多元化的特征，利益主体间的利益冲突和利益矛盾突显，使自然保护区管理机构的管理面临新的挑战。本文对利益主体和自然保护区进行概述，在此基础上，运用文献研究和问卷调查研究方法，基于利益主体及其多元化的视角，对鼎湖山自然保护区的管理现状进行分析，梳理出鼎湖山自然保护区的九个利益主体，并通过利益主体分类方法确定鼎湖山自然保护区的核心利益主体为相关政府部门、鼎湖山自然保护区管理局、周边社区居民、游客和经营人员与企业，它们是本文的主要研究对象。在此基础上，通过问卷调查以及实地调研方法，对鼎湖山自然保护区的五个核心利益主体进行了利益需求分析，结合鼎湖山自然保护区利益冲突管理现状对利益主体的冲突现状及其成因进行归纳总结。针对鼎湖山自然保护区利益主体冲突现状，从政府和鼎湖山自然保护区管理局的角度对鼎湖山自然保护区核心利益主体的管理提出了完善思路，希望能为鼎湖山自然保护区的可持续发展提供借鉴，同时促进我国自然保护区的管理。