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为了解禽流感灭活疫苗免疫鸡群是否还能够携禽流感带毒以及病毒在免疫鸡群和非免疫鸡群中的传播规律,本课题用分离鉴定的H5N1亚型高致病性禽流感病毒株进行了病毒在免疫鸡群和非免疫鸡群中的传播规律研究。
实验首先对分离的流感病毒进行了鉴定。经HI试验和对NA基因克隆、测序研究确定该分离物为H5N1亚型禽流感病毒;致病性实验结果为该毒株鸡胚半数感染量(EID50)为107.17/0.1ml;最小致死量致死鸡胚的平均时间(MDT)为33.6h;脑内接种致病指数(ICPI)为1.7;SPF鸡静脉内致病指数(IVPI)为1.6;用10倍EID50剂量的病毒鼻腔接种易感鸡可引起发病、死亡,病死鸡的心、脑、肝、脾、肾、肺、回肠、气管、胰、法氏囊等器官组织中的病毒含量在3.32~7.5log10EID50/0.1ml。以上研究结果表明,该毒株为高致病力禽流感病毒,对各种组织有较强的亲嗜性。
实验进一步将接种该病毒的鸡只分别与易感的SPF鸡只和HI抗体水平在3-6log2的SPF鸡只混养,以研究病毒在非免疫和免疫鸡群中的传播规律。结果接种病毒的鸡只在接毒后24h便可从泄殖腔、口腔、羽毛囊中检到病毒,同群饲养的易感SPF鸡在48h可从泄殖腔、口腔中检测到病毒。接种病毒鸡只和混养的易感鸡只,在接毒后24h均表现出明显的临床症状,潜伏期在24h,且病程短暂,很快死亡;在免疫鸡群中,HI抗体水平为6log2的鸡只检测不到排毒现象,且无临床症状和死亡;而HI抗体水平等于和低于5log2的鸡只能够于48h检测到排毒,但不表现出临床症状和死亡,排毒时间持续10d。这些结果表明,当禽流感疫苗免疫后,抗体水平等于和低于5log2的鸡只能够感染、携带和排出病毒,持续期为10d。本研究对防制禽流感的发生与传播具有重要参考价值。