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马度米星铵是聚醚类离子载体抗生素,主要用于防治鸡球虫病。因其在靶动物鸡体内代谢迅速,常以原型药物随粪便排出体外,污染包括水环境在内的生态环境。近年来,食用克氏原螯虾导致人类哈夫病的病例高达上百例,其症状与马度米星铵引起人类中毒的横纹肌溶解症状极为相似。本研究旨在探究马度米星铵对克氏原螯虾肝胰腺药物代谢酶的影响以及含有马度米星铵的克氏原螯虾的两种组织对小鼠的毒性作用和毒代动力学特征,探讨马度米星铵与哈夫病之间的联系并进行风险评估。具体分为如下三个部分:1马度米星铵对克氏原螯虾肝胰腺药物代谢酶的影响192尾雄性克氏原螯虾随机分为四组,一组为空白对照组,另外三组分别暴露于0.7mg·L-1、3.5 mg·L-1和7mg·L-1的马度米星铵药浴给药28d。在处理后的第7、14、21、28 d,各取12尾克氏原螯虾肝胰腺,对细胞色素P450（CYP450）、细胞色素b5（CYP b5）的含量,Ⅰ相药物代谢酶红霉素-N-脱甲基酶（ERND）、氨基比林-N-脱甲基酶（APND）、苯胺-4-羟化酶（AH）和Ⅱ相药物代谢酶谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UGTs）、N-乙酰基转移酶（NATs）的活性进行测定。同时利用实时荧光定量PCR对CYP450、gst、CYP b5基因的mRNA表达水平进行检测。结果显示,7 mg·L-1处理组CYP450含量在各时间段与对照组相比均显著增高,CYP b5含量则无显著变化;0.7mg·L-1处理组仅ERND活性显著升高,而7mg·L-1处理组的Ⅰ相药物代谢酶ERND、APND和AH的活性和Ⅱ相药物代谢酶GSTs、UGTs和NATs活性均显著升高;马度米星铵显著上调肝药酶相关基因gst、CYP450的表达,而CYP b5基因除第7d显著上调,其余时间点无显著变化。研究表明,马度米星铵对克氏原鳌虾肝胰腺药物代谢酶有诱导作用。2克氏原螯虾组织中的马度米星铵对小鼠的毒性作用采用两种途径使马度米星铵通过克氏原螯虾组织暴露于小鼠。药浴给药组:分别将克氏原螯虾在含有马度米星铵0.7 mg·L-1、3.5 mg·L-1和7 mg·L-1的药液中药浴给药72 h,处死后剥离各组肌肉与肝胰腺,测定两种组织各组的马度米星铵浓度,并分别制备成匀浆液灌胃小鼠。人工给药组:将配置好的3组含不同浓度的马度米星铵药液分别与空白的肌肉和肝胰腺匀浆,使其灌胃小鼠剂量分别为0.7 mg·kg-1、3.5 mg·kg-1和7 mg·kg-1,然后灌胃小鼠。两种途径均连续灌胃7 d,期间观察小鼠状态,记录每天体重变化和采食量,测定血生化参数,并制备四种组织（心脏、肝脏、肾脏、骨骼肌）的病理切片进行病理学分析。结果显示,药浴给药组:各组小鼠均表现正常,体重变化、采食量、血生化指标和组织病理学切片与对照组相比均无显著差异。人工给药组:随着剂量的增加,小鼠表现为精神沉郁、喜卧、体重和采食量显著下降;3.5 mg.kg-1和7 mg·kg-1处理组ALT、AST、BUN、LDH和CK的血生化指标显著上升;7mg-kg-1处理组在多个器官中观察到组织病理学损伤,包括肝细胞的水泡变性,肾上皮细胞脱落,心肌和骨骼肌肌丝的紊乱以及部分溶解。结果表明,7 mg·kg-1马度米星铵可以对小鼠产生较严重的毒性作用,但马度米星铵并不是克氏原螯虾致哈夫病的主要因素。3两种染毒模式下马度米星铵在小鼠体内的毒代动力学研究克氏原螯虾空白肌肉和肝胰腺组织分别与马度米星铵药液匀浆,制备成肌肉匀浆液和肝胰腺匀浆液。将234只雄性ICR小鼠随机分成3组,分别为肌肉匀浆组、肝胰腺匀浆组和马度米星铵药液组,且三组灌胃小鼠的马度米星铵剂量相同（7mg.kg-1）。每组分别于给药后 0.083,0.167,0.25,0.5,0.75,1,2,4,8,24,48,72,96h 随机采集6只小鼠血浆。小鼠血浆使用乙腈提取,在氮吹浓缩和流动相复溶后,利用超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）,在电喷雾正离子模式（ESI+）下选择多反应监测模式（MRM）分析马度米星铵的组织含量,以尼日利亚杆菌素为内标物质进行定量,并用WinNonLin软件进行毒代动力学参数分析。结果显示,本方法马度米星铵在1～400 ng·mL-1浓度范围内线性良好（R2>0.99）,回归方程为:y=1.69737x+1.62269,在小鼠血浆中回收率为:82.87%～117.74%,日内和日间精密度为:0.99～12.18%,表明该方法特异性强、灵敏度高、重复性好,适用于小鼠血浆中马度米星铵浓度测定。通过该方法测定,第一组参数平均半衰期（T1/2λ）为（23.60±7.38）h,达峰时间（Tmax）为（0.83±0.13）h,峰值浓度（Cmax）为（1489.36±366.08）ng·mL-1,平均药时曲线下面积（AUCo→t）为（1489.36±366.08）ng·mL-1,第二组参数T1/2λ=21.62±3.92 h,Tmax=0.79±0.19h,Cmax=1613.46±309.81 ng·mL-1,AUC0→t=19575.29±1893.97ng·mL-1,第三组参数 T1/2λ=20.30±3.54 h,Tmax=0.79±0.19 h,Cmax=1536.78±352.56 ng·mL-1,AUC0→t=24221.00±3054.99 ng·mL-1。