亚低温联合右美托咪定对心肌单相动作电位及缝隙连接蛋白Cx43表达的影响

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目的:评价亚低温联合右美托咪定对离体兔心肌单相动作电位及缝隙连接蛋白Cx43表达的影响,并探讨其可能机制。方法:健康成年新西兰白兔18只,体重2.0~2.5kg,随机分为3组(n=6):正常对照组(C组)、低温组(H组)、低温+右美托咪定组(HD组)。麻醉后开胸取心,制备Langendorff离体心脏灌注模型。平衡灌注15min后,C组继续灌注37℃K-H液60 min,H组灌注32℃K-H液60min,HD组灌注32℃含右美托咪定25μg/L的K-H液60 min。于平衡灌注末(T0)、继续灌注后15min(T1)、30 min(T2)和60 min(T3)时记录心率(HR)和三层心肌单相动作电位(MAP),计算最大去极化速度(Vmax),单相动作电位振幅(MAPA),单相动作电位复极50%,90%时程(MAPD50,MAPD90)和跨室壁复极离散度(TDR),记录早期后除极、延迟后除极及心律失常的发生情况。记录完毕后取左心室前壁心肌组织进行western blot和免疫组织化学染色法检测缝隙连接蛋白Cx43的表达和分布。结果:1.HR的比较:T1-3时点,H组与HD组心率明显减慢,与C组比较差异有统计学意义(P<0.05);H组和HD组各时点相比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.单相动作电位指标的比较:(1)单相动作电位复极50%时程(MAPD50)的比较:T1-3时点,H组与HD组三层心肌MAPD50明显延长,与C组比较差异有统计学意义(P<0.05);H组和HD组三层心肌各时点相比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)单相动作电位复极90%时程(MAPD90)结果的比较:T1-3时,H组与HD组三层心肌MAPD90明显延长,与C组比较差异有统计学意义(P<0.05);H组和HD组三层心肌各时点相比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)跨室壁复极离散度(TDR)的比较:T1-3时点,H组与HD组TDR明显增大,与C组比较差异有统计学意义(P<0.05);H组和HD组各时点相比较差异无统计学意义(P>0.05)。(4)单相动作电位振幅(MAPA)的比较:三组T0-3时点三层心肌MAPA的组间及组内比较差异无统计学意义(P>0.05);(5)最大去极化速度(Vmax)的比较:三组T0-3时点三层心肌Vmax的组间及组内比较差异无统计学意义(P>0.05)。3.蛋白检测结果:(1)western blot法检测Cx43蛋白的表达结果:与C组相比较,H组和HD组Cx43蛋白表达明显降低(P<0.05),H组和HD组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)免疫组织化学染色法检测Cx43蛋白表达分布结果:C组Cx43阳性表达分布于心肌细胞端-端连接处,表达较多,且分布均匀;H组Cx43端-端侧表达较少且不规则;HD组阳性颗粒表达较少,排列紊乱。结论:亚低温可延长心室复极时程,增加跨室壁复极离散度,机制可能与其降低Cx43蛋白表达,并影响其分布有关;但25μg/L浓度的右美托咪定在亚低温下的应用未见对心脏电生理产生明显影响。
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