急性白血病化疗失败的重要原因是细胞发生多药耐药(Multidrug resistance,MDR)。耐药蛋白的表达是发生MDR的最主要机制。目的:对玻片表面化学修饰进行研究,探讨蛋白质芯片在检测白血病细胞MDR蛋白表达中的价值,以及进一步研究汉防己甲素和屈洛昔芬的逆转耐药机理,为两药的临床应用提供理论依据。方法:以玻片为基质,对四种化学修饰和蛋白质固定方法进行实验对比研究。蛋白质芯片检测多药耐药蛋白,是以细胞株(K562和K562/A02)、汉防己甲素和屈洛昔芬单独或联合作用的K562/A02耐药细胞及部分临床样品为实验研究对象。将固定在芯片上的三种膜转运耐药蛋白:P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白、乳腺癌耐药蛋白相应的单克隆抗体为研究体系,芯片直接与细胞孵育,以测定耐药蛋白的表达情况。同时用流式细胞术对耐药蛋白的表达进行检测。结果:对玻片化学修饰方法对比研究表明,琼脂糖修饰玻片接触面积大,具有三维结构,固定蛋白质能力最强。对多药耐药蛋白检测结果为:P-gP和BCRP在K562细胞表达率低,MRP1有较高水平的表达;在K562/A02细胞中P-gP和MRP1均有高水平表达,BCRP表达率低;经Tet、Drol单独和联合作用的K562/A02,仅下调P-gP表达,且具有时间依赖性,均未见明显下调MRP1和BCRP表达;临床病例的检测可见,在反复化疗失败的白血病患者三种耐药蛋白的表达高于健康和初诊未治者。与流式细胞术结果分析对比结果一致。结论:基于蛋白质芯片的多药耐药蛋白检测方法,结果可靠,具有高通量、低成本、制备简单、测定快速的优点,应用前景良好。Tet和Drol可能通过下调P-gP产生耐药逆转作用。