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菜用大豆属豆科，大豆属，栽培大豆种[Glycinemax(L.)Merr.]，也称毛豆、枝豆。因其营养价值高，深受消费者青睐。然而，与大豆一样，菜用大豆也是主要致过敏食物之一。其种子蛋白中含有的GlymBd30K，是一个显性过敏原，65％以上对大豆敏感的病人仅对GlymBd30K蛋白过敏。以菜用大豆‘NY-1001’为材料，利用RNA干扰技术，试图通过对GlymBd30K基因表达的抑制，获得GlymBd30K基因沉默的转基因植株。主要研究结果如下: 1.以菜用大豆‘NY-1001’的RNA为模板，经RT-PCR反转录，扩增并克隆大豆过敏蛋白基因（GlymBd30K）长度为395bp的反义、正义基因片段。过氧化氢酶内含子为间隔区，将GlymBd30K反义基因片段、内含子和GlymBd30K正义基因片段通过酶切位点连接在一起，将全长为1012bp的发卡结构插入载体pCAMBIA3301，构成可表达双链RNA的植物干扰载体pCAMBIA3301-30K-RNAi。 2.不同共培养时间和筛选剂bialaphos的浓度对农杆菌介导菜用大豆子叶节遗传转化效率的研究结果表明，共培养4天，GUS的瞬时表达效率和转化芽的再生率最优。共培养结束一周后加入筛选剂bialaphos，浓度为4mg·L-1。 3.通过农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化方法，以bialaphos为筛选剂，获得3份可遗传的转基因材料。PCR分析、GUS组织化学染色和Basta抗性鉴定表明转基因性状稳定地遗传给后代。Southern杂交显示，转基因的特性以单拷贝形式遗传给后代，且符合3∶1孟德尔遗传规律。通过qRT-PCR检测，籽粒发育期的GlymBd30K基因mRNA的表达显著受到抑制，只有痕量的mRNA表达;Westernblot分析表明成熟种子GlymBd30K蛋白的合成完全受到抑制。研究结果显示获得了GlymBd30K蛋白缺失的转基因菜用大豆新种质并证实RNA干扰技术可有效敲除菜用大豆过敏原基因GlymBd30K。