超声微泡是一种利用超声波进行定位和释药的新型靶向药物制剂,开创了超声定位靶向释药一个全新的研究领域。通过超声成像可观察到微泡在体内的运行情况,利用超声空化效应击碎微泡,达到靶向释放药物的目的,从而减少药物的用量,降低药物的不良反应。因此,超声微泡给药系统有广阔的应用前景和巨大的经济效益。羟喜树碱(Hydroxylcamptothecine,HCPT)是目前唯一用于临床的拓扑异构酶Ⅰ特异性抑制剂,可用于原发性肝癌、胃癌、头颈部癌、膀胱癌及直肠癌、白血病等多种恶性肿瘤的治疗,与其他肿瘤药物相比疗效高、毒性低、无交叉耐药性,是目前治疗多种恶性肿瘤疗效较好的化疗药物,但仍具有骨髓抑制作用和消化道毒性。因此,研究减少羟喜树碱毒性的新剂型是亟待解决的问题。课题以乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为成膜材料,制备载羟喜树碱的超声微泡。第一部分:羟喜树碱超声微泡制剂的制备1.建立紫外含量测定方法:标准曲线方程为A=0.0737C-0.1573(r=0.9994),在5.88μg·mL-1-11.76μg·mL-1范围内浓度与吸收度线性良好,精密度、回收率、稳定性均符合方法学要求。2.采用改进的复乳化-溶剂挥发法和冷冻干燥技术制备超声微泡。3.采用单因素考察筛选出制备工艺:内水相与油相体积比1:10、初乳超声功率200W、时间90s、复乳的超声功率100W、时间60s、搅拌速度为600 rpm,制备出平均粒径433nm的空白微泡。4.以包封率为考察指标,处方实验获得处方优化:HCPT 25.0mg、PLGA 1.8750g、初乳和外水相体积比1:15、3%PVA,制备出载药微泡的平均包封率为79.93%,载药量为0.4783%的载药微泡。5.初步稳定性考察载药微泡冻干粉在冰箱4℃条件下56d内稳定性良好。第二部分:羟喜树碱超声微泡制剂的药剂学评价1.建立HCPT微泡HPLC体外释放分析测定方法:标准曲线方程为A=491.77C+1601.8(r=0.9994),在0.41μg·mL-1-8.20μg·mL-1浓度与峰面积线性良好,精密度、回收率、稳定性均符合方法学要求。2.微泡外观圆整光滑,平均粒径为715nm,粒径范围为500-900nm,电荷分布在-40-0mv之间。具有良好的形态和分散性良好。超声照射可使微泡破裂。3.使用超声诊断仪观察微泡具有良好的增加超声信号的能力,体外成像清晰。4.研究未超声和超声照射时两种情况下微泡的体外释放行为。表明了未超声时,微泡释放符合缓释制剂的释放特点,10天基本释放完毕。超声照射时30min能迅速释放药物。第三部分:羟喜树碱超声微泡制剂的体内成像实验使用超声诊断仪观察微泡在超声照射作用时具有显著增强新西兰大白兔体内肝脏部位及肝脏肿瘤部位的超声显影效果。为超声定位靶向给药提供了直接可靠的依据。通过对羟喜树碱超声微泡制剂的研究,总结出本课题四大特色:①国内外学者利用微球[1]、脂质体[2-4]等作为羟喜树碱新的传递系统,以提高治疗效率,但仍存在靶向性不够和受患部位药物的血药浓度低等问题。本课题研究的载HCPT超声微泡制剂弥补这类问题。不仅有效防止羟喜树碱药物的转型,保证药物的最佳治疗效果;还在超声照射下药物可视的定向送达到体内有效部位,并通过超声最大限度的使药物在病变部位大量释放,从而提高病变部位的药物浓度,降低不良反应。对开发具有定点实时可视的靶向性释放,且能够降低毒性的新型抗肿瘤药物制剂进行了尝试。关于羟喜树碱超声微泡的研究国内外未见相关报道。②通过工艺筛选和处方优化,制备得到了包封率相对较高的超声微泡。通过制剂学评价,其形态圆整、分散性好、粒径和电荷电荷分布相对均匀。体外体内显影效果良好。③建立了紫外-可见分光光度法和HPLC测定微泡中HCPT含量测定方法。对微泡的载药量和包封率以及羟喜树碱超声微泡的体外释放特性进行了考察,为超声微泡这一剂型的特性研究奠定了基础。④观察了微泡在体内肝脏及肝脏肿瘤部位的超声成像图,为超声靶向系统的发展起到了一定的作用。