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蚜虫等刺吸式口器昆虫以取食植物韧皮部液汁为生，同时传播大量的植物病毒，对植物造成巨大的损害。植物基因工程技术的发展为防治这一类害虫提供了更经济有效的途径。目前植物抗虫基因工程中广泛使用组成型表达的启动子，这种不具有特异性的启动子往往对植物造成不良影响并且容易引起安全性方面的争议。因此，研究来自植物的新型韧皮部特异启动子，对于植物抗虫基因工程研究具有非常重要的意义。
龙葵(Solanumamericanum)蛋白酶抑制剂IIa(SaPIN2a)是一种丝氨酸型蛋白酶抑制剂，在韧皮部中大量存在。已有实验表明SaPIN2a的启动子可驱动报告基因在转基因烟草的根、茎和叶中的韧皮部特异表达，证实了SaPIN2a启动子是新型的韧皮部特异表达的启动子。本研究将已克隆的SaPIN2a启动子片段(1.55Kb)与雪花莲凝集素(Galanthusnivalisagglutinin，GNA)基因融合(SaPIN2a-gna)，构建植物表达载体。由于来自水稻的蔗糖合成酶(ricesucrosesynthase1，RSs-1)启动子是目前植物基因工程研究中较普遍采用的韧皮部特异表达启动子，为了比较RSs-l和SaPIN2a驱动gna在烟草中的表达强度和抗蚜虫效果，本研究同时构建了RSs-1启动子(2.3Kb)与gna融合(RSs-1-gna)的表达载体。此外，还构建了组成型表达的花椰菜花叶病毒(Cauliflowermosaicvkus，CaMV)35S启动子(0.9Kb)与gna融合(CaMV35S-gna)的表达载体，作为阴性对照。
三个植物表达载体经过限制性酶切鉴定后，导入农杆菌并转化烟草。经过卡那霉素抗性筛选和PCR鉴定，获得17株含SaPIN2a-gna的转基因当代植物。收获这些转基因植株自交得到的种子，选取其中5个株系进行转基因在子代的遗传分离分析，结果表明卡那霉素抗性在子代(T1)呈3：1分离。利用含RSs-gna和CaMV35S-gna的植物表达载体转化的烟草，也已得到再生植株，但尚未鉴定。