高速逆流色谱中天然产物分离及溶剂体系选择方法的研究

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高速逆流色谱(HSCCC)是一种无固定相支撑体的液液分配色谱技术,被作为一种分离纯化天然产物的有效手段。浮萍和湖北海棠都是传统中药,黄酮类物质是它们的主要活性成分。本研究选取浮萍和海棠叶中黄酮类物质进行高速逆流色谱分离的研究。利用HPLC法测定目标组分在一系列配比的溶剂体系中的分配系数,并根据分配系数筛选调整获得合适的溶剂体系。浮萍实验中的溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:10:1:10, v/v),对于不能分离的组分,利用循环高速逆流色谱法成功分离。湖北海棠叶实验中的溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:4:1:4,v/v),对于未能一步分离的组分采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-0.1mol/L Cu2+水溶液(1:4:1:4,v/v)成功进行了第二次HSCCC分离。HSCCC条件皆为:温度25℃,转速900r/min,正向洗脱,流动相流速2mL/min,检测波长280nm。合适溶剂体系的选择是逆流色谱实验成功的关键,本研究引入热力学模型NRTL为HSCCC的分离提供快速的溶剂系统选择方法。利用NRTL模型可以描述标准品在两相溶剂体系中的分配行为,利用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统进行性能评价,将计算得到的六个标准品的分配系数与实验值进行比较,结果证明NRTL模型能够快速可靠地预测分配系数值。本研究结果证明,HSCCC是分离天然产物的有效方法,而NRTL溶剂选择方法能够快速确定溶剂体系,对减少HSCCC中溶剂系统选择的工作量具有重要意义。
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