DNA分子的拉曼光谱研究

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脱氧核糖DNA是遗传信息的载体,自1953年其双螺旋结构发现以来,对其研究更加深入。国内外不断出现借助高灵敏度的拉曼技术对DNA研究的报道。近几十年来,涌现出各种基底上的DNA的表面增强拉曼散射谱线。表面增强拉曼散射(SERS)光谱能够提供丰富的分子结构的信息,并能提供非常强的拉曼散射信号。这是由于电磁场增强与化学增强的作用。化学增强因子在10-100范围内,而总的增强因子在103到1014范围内,因此电磁场增强占主导地位。电磁场增强是入射电场与金属表面的电子的相互作用,这引起金属表面等离子体的集体振荡。最强的表面增强拉曼散射信号,以及单分子的表面增强拉曼散射信号通常出现在金属纳米粒子聚集的不规则的地方。Brus等人的研究揭示出单分子的SERS“活性点”很可能会出现在两个或者多个分子连接的地方。在他们工作中研究发现分散粒子的SERS信号很弱,很强的SERS信号通常发生在很多粒子聚集的地方。这是由于粒子之间近距离的耦合能够发生在结合点或者SERS的“活性点”。基于这些银粒子或金粒子的聚集能形成有效可靠的SERS活性基底。银粒子普遍用来作为表面增强拉曼散射的基底,因为它具有很好的增强效果而且粒子非常稳定。最常用的一种银胶体的制备方法是通过柠檬酸钠还原硝酸银,也就是所谓的Lee-Meisel方法。另一种方法是根据Creighton的程序用硼氢化纳还原硝酸银。本文主要研究内容:1.制备银胶体及检测。首先根据Creighton方法,用硼氢化纳还原硝酸制备银胶体,在制备的银胶体中加入酒精或者是腺嘌呤使其聚集。用紫外分光度计及原子力显微镜对其吸收光谱、表面形貌进行检测。2.以罗丹明B(RhB),罗丹明6G(R6G)作为探针分子测定酒精引起银胶体聚集形成的表面增强拉曼散射基底及腺嘌呤引起银胶体聚集形成的表面增强拉曼散射基底的增强效果。试验发现,腺嘌呤引起银胶体聚集形成的SERS基底上的“活性点”比酒精引起银胶体聚集形成的SERS基底上的“活性点”活跃。3.测定DNA在腺嘌呤引起银胶体聚集的SERS基底上的拉曼光谱。
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