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本研究通过对本实验室研制的禽致病性大肠杆菌的三个突变株E058△lpxL△lpxM(O2)、E516△lpxL△lpxM(O1)、E522△lpxL△lpxM(O78)在体内、外传代的遗传稳定性进行评价，在此基础上我们以这三个菌株研制了Montanide ISA71 VG三联油佐剂灭活苗、MontanideIMS1313 VG NST三联水佐剂灭活苗和Rehydragel LV三联铝胶佐剂灭活苗，并对这3种疫苗进行了免疫效力与安全性研究，主要结果概括如下: 1、疫苗菌株稳定性:三个突变株E058△lpxL△lpxM(O2)、E516△lpxL△lpxM(O1)、E522△lpxL△lpxM(O78)分别在固体LB琼脂平板连续传30代、在1日龄SPF鸡体内连续传5代进行体外和体内稳定性的测定，对连续传代前后突变株的菌落形态、血清型以及突变基因序列进行比较，结果表明，本实验室研制的这三个突变株无论是在体内或体外的遗传稳定性好，在体外和体内传代过程中并未发生遗传变异。 2、疫苗安全性:3种疫苗分别以0.5 mL/羽单剂量、0.5 mL/羽单剂量重复、1 mL/羽超剂量免疫试验鸡。结果表明，Montanide IMS1313 VG NST水佐剂灭活苗组在2倍于正常免疫剂量(0.5 mL/羽)免疫时，少数试验鸡出现5～8 h的精神稍差，之后迅速恢复，其他组均无异常反应，健康生长。剖检，Montanide ISA71 VG油佐剂灭活苗试验组在注射部位有小的炎性结节，但该结节随着雏鸡的生长逐渐变小、消失。因此，所研制的3种疫苗均具有良好的安全性。 3、疫苗的免疫效力:14日龄SPF鸡颈部皮下注射0.5 mL/羽，于免疫后14d进行攻毒保护试验，O1、O2型E.coli拘攻毒剂量均为1.0×108 CFU，O78型E.coli的攻毒剂量为1.0×109CFU，结果表明，对同源O1的攻击，Montanide ISA71 VG油佐剂灭活苗、MontanideIMS1313 VG NST水佐剂灭活苗和Rehydragel LV铝胶佐剂灭活苗免疫保护率分别为70％、40％和60％;对同源O2的攻击，Montanide ISA71 VG油佐剂灭活苗、Montanide IMS1313VG NST水佐剂灭活苗和Rehydragel LV铝胶佐剂灭活苗免疫保护率分别为70％、50％和70％;对同源O78的攻击，Montanide ISA71 VG油佐剂灭活苗、Montanide IMS1313 VG NST水佐剂灭活苗和Rehydragel LV铝胶佐剂灭活苗免疫保护率分别为90％、60％和80％，所研制的3种疫苗中，Montanide ISA71 VG油佐剂灭活苗具有对同源菌攻击具有良好的免疫保护率，保护率均在70％以上，适合商品鸡的免疫接种;Montanide IMS1313 VG NST水佐剂灭活苗和Rehydragel LV铝胶佐剂灭活苗，对同源菌攻毒的免疫保护率较低，不宜作为试制的禽大肠杆菌病灭活疫苗的佐剂。 于免疫后7d、14d、21d、28 d测定血清中针对攻毒菌株外膜蛋白的抗体效价，结果表明，所研制的3种疫苗中，Montanide ISA71 VG油佐剂苗抗体产生速度最快，抗体水平较高，Rehydragel LV铝胶佐剂灭活苗和Montanide IMS1313 VGNST水佐剂灭活苗抗体产生速度较慢，抗体水平较低。这3种疫苗按产生的抗体水平高低的顺序依次为MontanideISA71 VG油佐剂灭活苗、LV铝胶佐剂灭活苗、Montanide IMS1313 VG NST水佐剂灭活苗。 攻毒两周后对存活鸡进行扑杀采集其心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及法氏囊进行病理切片的制备、观察其病理变化。结果显示，免疫攻毒组存活鸡和健康对照组鸡的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及法氏囊无任何病理变化，而攻毒对照组死亡鸡的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏呈现局灶性坏死，坏死灶内炎性细胞浸润，法氏囊正常，表明免疫攻毒组存活鸡的疫苗保护效果良好。