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2010年4月以来,江苏、浙江、福建、安徽、江西和河北等省的鸭发生了一种以产蛋率、采食量显著下降,具有脑炎样神经症状的传染病,研究表明引起该病的病原为不同于现有资料报道的一种新的黄病毒,即坦布苏病毒。该病毒感染率高达100%,发病率和死亡率在5%~30%之间,产蛋率下降40%~50%,给鸭鹅养殖业造成巨大的经济损失。为了研究该病发病机理,本试验建立了其发病模型;为了更好地防控该疫病的爆发,还进行了攻毒保护性试验和免疫抗体持续期监测。将168只35日龄无坦布苏病毒感染的樱桃谷肉鸭随机分成7组,每组24只,其中1~6组分别以不同含量的鹅源坦布苏JS804株病毒肌肉注射进行攻毒,对照组肌肉注射相同剂量的PBS。攻毒后每天观察临床症状。分别于攻毒后2d、4d、6d、8d、13d、20d每组随机取4只攻毒鸭扑杀,分别取每只鸭各脏器样品2份,一份放-20℃冻存,用于多重RT-PCR检测病毒;另一份用4%多聚甲醛固定,用于免疫组织化学分析和组织病理学分析。临床症状观察:试验鸭于攻毒后腿瘫、头颈扭曲、行走不稳。剖检变化:各主要脏器均出现病变,其中以脾脏、肝脏、脑最为明显。套氏RT-PCR结果:攻毒后第8天各脏器病毒阳性检出率最高,其中以脾脏检出率最高;通过对不同攻毒量各组的检测,确定鸭的攻毒量为1.6×106TCID50。HE染色病理切片观察:脑神经元细胞变性、坏死;肝细胞水泡变性、肝小叶结构破坏;脾脏淋巴细胞变性、坏死,红、白髓界限不清。免疫组化定位发现:心肌纤维细胞、脾脏生发中心、肺泡上皮细胞、肾小球上皮细胞、脑血管内皮细胞、肝细胞均有棕黄色阳性信号。将50只14日龄无坦布苏病毒感染的樱桃谷肉鸭随机平分成5组,每组10只,其中1~4组分别以不同抗原含量的坦布苏病毒病灭活疫苗肌肉注射进行免疫,对照组肌肉注射相同剂量的PBS。免疫后21天采血,测定每一只鸭的抗体水平,用第二章已确定攻毒量(1.6×106TCID50)的鹅源坦布苏JS804株病毒进行攻毒,攻毒后8天扑杀所有试验鸭,多重RT-PCR检测鸭脾脏中有无坦布苏病毒。结果:当抗体效价是29时,攻毒保护率达88.9%,鸭坦布苏病毒抗体保护临界值为29;同时确定了灭活疫苗最小免疫量是3.8×105TCID50。30只23日龄无坦布苏病毒感染的樱桃谷肉鸭随机均分成3组(单次免疫组、两次免疫组、对照组),免疫后定期采血测定抗体效价。结果表明两次免疫效果较单次免疫好。20只23日龄无坦布苏病毒感染的樱桃谷肉鸭随机均分成1、2组(免疫组和对照组),20只54日龄无坦布苏病毒感染的樱桃谷肉鸭随机均分成3、4组(免疫组和对照组),免疫后定期测定抗体效价,监测维持期。发现抗体效价半年能维持在较高的水平,且两种日龄首免鸭无明显差异。