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乳腺癌是最常见的恶性肿瘤之一。在西欧和北美为女性肿瘤首位。随着肿瘤干细胞概念的提出,以及实体瘤中肿瘤干细胞的成功分离,人们越来越确信肿瘤干细胞是肿瘤的生长,恶化和转移的内在原因。
最仞在神经于细胞的培养过程中采用非贴壁的方法形成了的细胞团,被称为neurosphere。neurosphere能悬浮形成克隆,每个neurosphere大约含200-500个细胞,用含有EGF的无血清培养可分化成神经细胞。采用相似的方法Wicha和他的同事发展用非贴壁的方法培养乳腺干细胞,被称为mammosphere。并且mammosphere细胞和CD44+/CD24-细胞群基因表达极其相似,这两种模型已经广泛用于研究乳腺肿瘤干细胞。本实验利用mammosphere作为模型研究乳腺肿瘤于细胞的蛋白质表达差异。
本研究利用乳腺癌细胞系MCF-7在体外培养出了mammosphere。并利用蛋白质组学高通量方法对mammosphere和MCF-7细胞进行差异蛋白质组学研究。利用双向电泳和质谱,共鉴定出34个表达差异蛋白质点,其中在mammosphere上调蛋白质有7个,下调蛋白质有27个。这些差异蛋白质参与了细胞骨架、压力应激、细胞存活、信号转导、新陈代谢、肿瘤发生、耐药和转移等。
从这些差异蛋白质中,选取了GAPDH,CK10,FKBP4和GIPC1蛋白质,通过westernblot免疫印迹法对蛋白质表达差异进行验证。免疫印迹结果与2-DE图谱分析结果保持了较高的一致性。本实验室正在进一步研究这四个蛋白质的生物功能以及它们在乳腺癌耐药中的作用