基于胶体金制备金膜的DNA表面等离子体子共振传感器的研究

被引量 : 0次 | 上传用户:a328623784
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
大多数的生物传感器通常需要对样品进行标记,如荧光标记、酶标记等,而标记过程往往复杂,并常会干扰原有体系的性质,影响生物分子的活性。表面等离子体子共振(Surface Plasmon Resonance,SPR)传感器由于具有不需标记、灵敏度高等特点,可更客观、实时地获取生物体系中活体的信息,特别适合研究生物分子的相互作用,已成为最具发展潜力的生物传感器之一。 SPR传感器已在生物医学、新药和新型诊断试剂的开发、环境监测等领域得到广泛应用。但随着生命科学的迅猛发展,需要对越来越多的生物分子相互作用进行更深入的研究,SPR传感器由于其特有的性质,将发挥越来越大的作用。因此,SPR传感器仍需进一步发展,首先,由于低浓度和较小生物分子所引起的介电常数变化非常小,目前的SPR传感器很难直接实现对这些物质的检测,所以探索和发展高灵敏SPR传感器的研究是颇受重视的焦点之一。此外,由于SPR传感器的实验费用相对较高,无形中影响了SPR的研究及应用,这使得降低实验成本成为了目前SPR研究工作中的热点之一。基于以上这两点,本文拟从提高灵敏度及降低实验耗材之一——金膜的成本两个角度出发进行研究。 本论文的研究工作分为以下几部分: (1)本文改进了一种基于胶体金制备金膜的方法,该方法首先将胶体金颗粒吸附在玻片表面,然后以其为成核中心,使其在存有新近还原的Au的条件下逐渐成长,最后在玻片表面形成一层光亮的导电金膜。基于此成膜的机理可知玻片表面硅烷化方法及胶体金粒径对金膜的形成和金膜的性质至关重要,可影响SPR光谱的共振深度和半峰宽,绝大程度上决定了SPR传感器的灵敏度。本文着重从这两方面进行研究,优化了成膜的实验条件,获得了具有较强附着力和较深共振深度的金膜。 将该方法制备的金膜用于本实验室研制的SPR传感装置,检测了水溶液中的乙醇、葡萄糖和DNA,所得实验结果与在真空蒸镀方法制备的金膜上进行实验的结果相对比,结果基本一致,说明经过上述改进的方法制备的金膜能较好地满足SPR实验要求。该方法成本低、设备简单、操作方便,有望在SPR传感器中得到广泛应用。本文的研究有利于进一步提高仪器的性价比。 (2)本论文描述了一种通过施加电场使基于SPR的DNA传感器灵敏度提 高的新方法。该方法的作用机理是:外加电场引起修饰在金膜表面的探针DNA 取向发生改变——使探针DNA直立或平躺在金膜表面,影响了DNA的杂交效 率,改变了传感器的灵敏度。当金膜带负电,探针DNA直立在金膜表面,使空 间位阻减小,杂交效率随之提高,灵敏度提高。本文通过控制外加电场使检测下 限从 0。5 "g/inl降至 0.lug/ffil,极大地提高了传感器的灵敏度。 该研究对修饰了探针DNA的金膜施加电场后,探针DNA能保持活性。该 传感器稳定、灵敏、选择性好、可以再生。本研究为SPR传感器灵敏度的提高 提供了一种新颖的可选的方法。另外,许多生物分于都和DNA一样具有荷电性, 该方法有望在其他类似的生物传感器中得到应用。 ()利用基于 SPR的 DNA传感器研究了系列含惫小分子与固定化 DNA的 相互作用,结果表明这些含葱小分子可与金膜上dSDNA及SSDNA发生不同程度的 作用。通过(2)中方法获得了高覆盖率的 dSDNA层,比较了含恿小分于与不同 覆盖率的dSDNA层作用引起的共振波长位移值,进一步说明了含葱小分子与dSDNA 相互作用大于其与SSDNA相互作用。通过考察离子强度对含葱小分子与DNA相互 作用的影响,结果表明两者相互作用主要包括静电作用和沟槽作用。此外,含葱 小分于与 DNA相互作用的大小和其结构有关,小分子 9、10位支链部分越长、越 复杂,其与DNA之间的相互作用越小,当其支链复杂程度超过一定程度,甚至难 以检测到SPR光谱的变化。该研究为小分于与DNA相互作用的研究提供了一种新 的手段,同时由于含葱的小分子可当作抗肿瘤的药物,本研究有利于从分子水平 上了解抗癌药物的作用机理。
其他文献
本文从微量元素营养的角度,对青海省三角城种羊场夏(六月中旬)、秋(九月中旬)、冬(十二月中旬)三季的水、土壤、牧草、绵羊被毛、血液、组织器官及粪、尿中铜、锰、铁、锌、钼和硒6
电力系统存在着很多电感及电容元件,常常因为系统扰动而出现铁磁谐振现象,给设备的安全运行带来了隐患。方家山核电和福清核电220kV倒送电期间相继发生两起铁磁谐振现象。本
简述了 ISD语音芯片 ,重点介绍了基于现场可编程门阵列 ( FPGA)开发设计ISD语音芯片的实现方法
完善粮食主产区利益补偿政策对保障我国粮食安全和区域协调发展具有十分重要的作用。通过系统梳理、分析我国当前对粮食主产区的主要补偿政策及其实施状况,并通过对典型地区调
中国市场经济体制的完善需要政府职能的根本性调整,政府的经济职能就是为民众和企业提供公共产品。论文在系统总结和借鉴西方公共产品理论、公共选择理论、财政分权理论基础上
本课题的任务是针对通信信号电磁环境模拟器系统的方案要求,设计实现背景信号模拟器V/UHF波段后端高速信号的复接与D/A转换,为后级的频率综合器的信号频谱搬移提供了基本信号。
利用内部VDD/2基准电压产生恒定电流对电容进行充放电控制,实现了一种应用于D类功放的CMOS电流控制线性三角波发生器。理论推导和spectre仿真验证结果显示,其振荡频率与电源
本文首先以振动压路机为重点,介绍了国内外压实机械的概况和发展方向,结合我国国情,论证了开发具有自己知识产权的小型压实机械产品的必要性。在过去6年多的科研努力基础上,本文
从考古发掘的图像资料与古文献的相关记载出发,探讨轩辕帝与有熊氏的关联:一方面检讨远古"熊图腾"的成因,说明文学与人类学的多元视角和知识视野对追寻远古失落之文化记忆的
<正>随着我国农业的不断发展,人们从重视农产品数量向数量质量并重转变,农民耕作模式、施肥习惯的改变和土壤的承受力,都对肥料也提出了更高要求。在这一形势下,赋予更多功能