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目的1.观察MCFA和ALA对APP/PS1转基因痴呆模型小鼠学习和记忆功能的影响及其相关机制的探讨。2.观察MCFA和ALA对APP/PS1转基因痴呆模型小鼠体内DA和NE的影响及其相关机制的探讨。3.观察MCFA和ALA对APP/PS1转基因痴呆模型小鼠体重、血脂和β羟丁酸水平的影响。方法1.以25只无特定病原体(Specified pathogens free,SPF)级健康4w龄雄性APP/PS1转基因小鼠(APPSWe.PSEN1d9)为研究对象,按空腹体重随机分为α亚麻酸和中链脂肪酸联合组(ALA+MCFA组)8只、中链脂肪酸组(MCFA组)9只、长链脂肪酸(Long Chain Fatty Acid,LCFA)组8只,经鉴定后同窝阴性野生型小鼠(不含APP及PS1基因型)10只作为WT组。2.不同脂肪酸配比饲料干预各组小鼠至36周后进行Morris水迷宫试验,观察分析各组小鼠行为学实验差异,先行定位航行试验训练,连续4d,第5d行空间探索试验。3.行为学实验结果有差异即可麻醉处死,取血样并分离小鼠大脑海马和皮层组织,利用免疫组化和Western blot法技术,比较各组脂肪酸对APP/PS1转基因痴呆模型小鼠的APP、Aβ、Tau、TH、MAO等蛋白表达的影响。4.取小鼠血清后,酶法测得各组小鼠血脂水平,并利用高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS-MS)等技术,比较各组脂肪酸对APP/PS1转基因痴呆模型小鼠的去甲肾上腺素、多巴胺以及β羟丁酸水平的影响。结果1.Morris水迷宫试验:定位航行试验中,与LCFA组相比,ALA+MCFA组逃避潜伏期均值在第2、3、4天明显缩短(p<0.05),且在第4天时又明显小于MCFA组(p<0.05),说明其学习能力最好;MCFA组潜伏期均值降低速度较稳定,与LCFA组相比第1、4天时分别有显著统计学差异(p<0.05);各组与第1、2天的成绩进行组内比较显示,仅ALA+MCFA组逃避潜伏期均值分别在第3、4天出现明显下降(p<0.05),也说明该组小鼠学习能力改善最为显著。空间探索试验中,4组小鼠在平台所在象限(第3象限)穿越平台的平均次数分别为:ALA+MCFA组2.63次,MCFA组2.44次,LCFA组0.25次,WT组2.78次。方差分析结果显示,与LCFA组相比,ALA+MCFA和MCFA差异均有统计学意义(P<0.05)。2.Westem blot检测结果:Western blot印迹灰度应用scion image软件分析后,各项指标与GADPH内参值的面积灰度比值,与WT组相比,APP/PS1三组小鼠海马、皮层的Aβ42、APP和Tau蛋白水平均不同程度显著增加(p<0.05)。与LCFA组相比,ALA+MCFA组和MCFA组海马和皮层Aβ42和Tau蛋白表达量则明显减少(p<0.05);ALA+MCFA组和MCFA组两组间皮层Aβ42、APP和Tau蛋白水平虽均无统计学差异(p>0.05),海马APP、Tau水平也无统计学差异(p>0.05),但Aβ42蛋白表达则MCFA组明显较高(p<0.05)。和LCFA组相比,ALA+MCFA和MCFA组血清的DBH明显降低(P<0.05);而MAO表达水平则无显著性差异(P>0.05);ALA+MCFA组小鼠海马TH表达水平显著高于LCFA组(P<0.05),而MCFA组大脑TH表达水平则无统计学差异(P>0.05)。3.免疫组化结果:与野生对照组相比,AD模型组小鼠脑海马Aβ斑块数量明显增多。与LCFA组相比,ALA+MCFA和MCFA组小鼠脑海马组织CA1、DG区Aβ斑块相对较少。4.高效液相色谱串联质谱法结果:与LCFA组相比,ALA+MCFA和MCFA组小鼠血清中β羟丁酸和去甲肾上腺素的水平均较高,但差异无统计学意义(p>0.05);ALA+MCFA组小鼠大脑DA水平虽然高于LCFA组,但差异也不显著(P>0.05);MCFA组大脑DA水平则明显高于LCFA组(P<0.05)。5.血脂检测结果:和LCFA组相比,ALA+MCFA和MCFA组小鼠胆固醇和甘油三酯都明显较低(P<0.05),说明ALA、MCFA均能改善AD模型小鼠的脂代谢。结论1.Morris水迷宫试验结果表明,ALA+MCFA组和MCFA组学习记忆功能均要优于LCFA组,且小鼠逃避潜伏期均值、在平台所在象限内穿越平台平均次数的差异均有统计学意义,说明ALA和MCFA都能明显提高APP/PS1转基因模型小鼠Morris水迷宫成绩,联合干预组效果更佳。2.Western blot和免疫组化结果表明,ALA、MCFA均有改善AD模型小鼠学习记忆能力的作用,其作用机制可能是减少AD模型小鼠Aβ42毒性蛋白的生成与沉积、并降低了 Tau蛋白的磷酸化水平。3.ALA+MCFA和MCFA组小鼠TC和TG水平均明显低于LCFA组,说明ALA和MCFA都具有改善血脂的作用。4.虽然联合干预和MCFA组NE水平均有升高趋势,前者DA水平也较高,但与LCFA组相比无统计学差异;MCFA则可以显著升高大脑组织DA水平,联合干预还能促进DA、NE合成关键酶TH的表达,但抑制了 DBH的表达。