目的:本研究观察维甲酸衍生物对白血病细胞株K562和NB4细胞的增殖的影响和诱导分化活性,并筛选出有具有药理学活性的衍生物进行药效学和诱导分化机制的研究。方法:1.新型维甲酸类衍生物作用于K562和NB4细胞后,通过MTT法检测细胞的增殖;瑞氏染色法在倒置相差显微镜下观察加药处理前后细胞形态学变化。NBT还原实验法分析细胞的分化指标。FCM检测分析细胞周期和细胞表面分化抗原CD_11b、CD₁₃变化。2.筛选出具有活性的化合物后,采用细胞计数方法观察白血病细胞在不同浓度的药物作用下生长曲线的改变, NBT还原实验法分析细胞在不同浓度作用下的分化指标,FCM检测分析细胞周期及K562细胞表面分化抗原CD₄₅、CD₇₁、CD₁₁₇和NB4细胞表面分化抗原CD_11b、CD₁₃、CD₁₄的变化。RT-PCR检测细胞周期相关因子Cyclin D1、Cyclin E、PCNA、CDK2、CDK4、CDK6、P21^cip1、P27^kip1、P57^kip2 mRNA表达改变。Western Blot法检测cyclin D1、CDK4蛋白、PML/RARα融合蛋白和RARα蛋白表达的改变。结果:1.新型维甲酸衍生物作用3d后,4a-02,5a-02抑制K562和NB4细胞增殖作用呈剂量依赖性增加,10^-5 mol/L抑制作用最强。维甲酸衍生物(10^-5 mol/L)的诱导分化活性则表现在油镜下观察白血病细胞向粒系分化成熟的改变,2a-03,4a-02,5a-02,6a-02作用后NBT阳性细胞率增加,K562细胞表面分化抗原CD11b在2a-03,3a-02,4a-01,5a-02作用后表达量增加,NB4细胞在2a-01,2a-02,2a-03,4a-01,5a-01,5a-02作用后,CD11b增加同时CD13表达则减少。通过对细胞周期的分析,发现2a-03,4a-01,4a-02,5a-02对K562和NB4细胞周期均有影响,表现为G0/G1期细胞表达量增加,S期细胞表达量减少,呈G1期阻滞。2.经过活性筛选发现,维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯（4-amino-2-trifluoromethyl-phenyl retinate, ATPR）是抑制增殖和诱导分化活性较强的衍生物,进行药效学研究发现,ATPR呈浓度依赖和时间性依赖抑制K562和NB4细胞增殖的作用。ATPR诱导分化活性表现为NBT阳性细胞率增加,NB4细胞表面分化抗原CD11b表达增加,CD13表达减少,CD14表达增加,作用与阳性对照ATRA相类似。并随作用时间延长而变化加大。ATPR作用3d后G0/G1期细胞表达量增加,S期细胞表达量减少,呈G1期阻滞。周期相关因子Cyclin D1、Cyclin E、CDK2、CDK4、CDK6、mRNA在ATPR作用3d后表达有减少改变,PCNA mRNA在ATPR作用7d后有减少改变。P57^kip2mRNA有明显增加的变化,但P21^cip1、P27^kip1mRNA不但没有增加,反而有略减少的趋势。cyclin D1和CDK4蛋白表达减少,PML/RARα融合蛋白和RARα蛋白表达也呈减少的改变。结论:1.维甲酸衍生物（2a-03、4a-02、5a-02）是抑制增殖和诱导分化活性较强的衍生物,提示以氨基三氟甲基苯基维甲酸酯为出发点开发具有更好的诱导肿瘤细胞分化和抑制增殖活性的维甲酸类药物具有重大意义。2. ATPR（4a-02）有较强的抑制K562和NB4细胞增殖并诱导其分化的活性,并通过上调P57kip2mRNA,抑制Cyclin-CDK激酶复合物,发挥细胞周期阻滞的作用。