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对于终末期肝病，肝脏移植是最有效的治疗手段。据统计，目前全世界每年正以8000例的速度开展此项手术，而且累计例数逐年增加。肝脏移植过程中缺血再灌注损伤的发生是在所难免的，其对于移植肝脏原发性无功能或功能不全及由非吻合因素造成的胆管狭窄的发生起着非常重要的作用。与缺血再灌注损伤有关的并发症已经成了肝脏再移植和导致死亡的主要原因，而且随着肝脏移植数量的增加及符合要求的供肝短缺，这一问题会变得更加突出。因此，对于脏器缺血再灌注的机理探索已成为移植领域研究的热点。 目前研究肝脏缺血再灌注损伤通常采用的方法有：(1)对离体或原位肝脏行人工或机械灌注法；(2)肝脏原位热缺血再灌注法；(3)原位肝脏移植法。各种方法均有利弊。临床上，随着取肝技术的日益成熟，热缺血时间越来越短，使得冷缺血再灌注损伤备受关注。许多研究表明：这一事件与移植物的功能发挥不良，急性排斥反应，移植物与受体的存活密切相关。为了更便捷肝脏缺血再灌注损伤基础研究，我们建立了一种小鼠肝脏原位冷缺血再灌注模型来模拟肝脏移植中缺血再灌注过程。浙江大学博士学位论文 材料与方法 选用8l 周龄25－309健康雄性BALB／C小鼠作为实验动物，共分为三组：观察组、假手术组、实验组。所有动物采用 2％氯胺酮针 0．ZInl作腹腔内注射麻醉，清洁环境手术。手术步骤：进腹后，游离肝卜卜腔静脉、肝动脉、门静脉以及幽门静脉，打活结先后阻断幽门静脉、肝动脉、卜腔静脉，用30G穿刺针穿刺I静脉，灌注4℃生理盐水IInl，30see后，用微血管夹在肝门处阻断门静脉，Iager七液冰屑覆盖肝脏四周表面。无肝期20ndn后，先后开放－卜腔静脉、肝动脉、IJ静脉以及幽门静脉，门静脉处穿刺点用棉球压迫止血后关腹。实验组再灌注后lh、3h、6h、24h时点经h腔静脉穿刺取血，处死动物同时获取肝脏组织。观测动物生存率、血清ALT和＊ST水平、组织病理学变化。 结 果 原位冷缺血再灌注术后小鼠存活 7大以上者视为长期存活，7大生存率为 83．3％。再灌注前手术时间为（10石士2二）nun，再灌注后手术时间为（5二士1．3）min，术中出血量均小于 0．snil。～例小鼠为术后粘连性肠梗阻致死，另一例死因不明。再灌注 lh，小鼠血清 ALT、AST的浓度即明显升高（分别为 317土 70Mi VS 80士 4．ZufL：662士 96MIVS124士10二M P＜0．05），至再灌注后6h达到高峰，24h后有较大幅度下降。组织病理学结果显示，再灌注后6h，肝脏组织损害最明显。具体表现为：中性粒细胞浸润，肝细胞浊肿，肝细胞索排列不整齐，肝窦分界不清，有较多的凋亡细胞和继发性坏死。 结论 1．阻断肝卜卜腔静脉、肝动脉和门静脉能保持灌注后肝脏无肝期内的无血状态。 2．成功建立小鼠肝脏原位冷缺血丙灌庄模荆，本模刑恻J地反映了肝脏缺血再灌注损伤后血消酶学和组织病理学的动态变化。