草果黄酮微波辅助提取工艺优化及其抗氧化活性的研究

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目的采用微波辅助提取法对草果黄酮提取工艺进行优化,以响应曲面法确定草果黄酮的最佳提取工艺。测定草果和阳春砂仁、红豆蔻、小豆蔻3种姜科植物乙醇提取物的抗氧化相互作用,确定草果乙醇提取物与3种姜科植物之间是否存在抗氧化协同作用,并且对草果和3种姜科植物乙醇提取物进行体外模拟消化,测定抗氧化活性随着时间变化的情况。方法1.对微波辅助提取草果黄酮的工艺进行研究,考察微波功率、乙醇体积分数、液料比和微波时间对草果黄酮提取量的影响,在单因素实验的基础上,选取乙醇浓度、液料比和微波时间三因素,依据Box-Benhnken中心组合试验设计原理,设计响应面法分析试验优化提取工艺。2.将草果和阳春砂仁、红豆蔻、小豆蔻的乙醇提取物分别以1:9、3:7、1:1、7:3、9:1的体积比进行混合。采用等辐射分析法评价草果和3种姜科植物乙醇提取物组合的抗氧化关系。3.采用DPPH和ABTS法对草果和阳春砂仁、红豆蔻、小豆蔻乙醇提取物的模拟体外消化产物的抗氧化活性进行研究。在模拟体外胃消化过程中,于0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 h进行取样;在模拟体外肠消化过程中,于0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 h进行取样。结果1.微波辅助提取草果黄酮的最佳工艺条件:乙醇体积分数60%,液料比30mL/g,微波时间34 s,在此条件下所得的草果黄酮提取量为1.23 mg/g。2.草果和3种姜科植物组合(草果-小豆蔻,草果-阳春砂仁,草果-红豆蔻,小豆蔻-阳春砂仁,小豆蔻-红豆蔻,阳春砂仁-红豆蔻复合物)中的大部分组合均表现出抗氧化协同作用。在DPPH试验中,最好的三个姜科植物组合的抗氧化活性顺序为:9:1阳春砂仁-红豆蔻(IC50:0.10±0.01 mg/mL)>7:3草果-红豆蔻(IC50:0.12±0.01 mg/mL)>9:1草果-小豆蔻(IC50:0.12±0.03 mg/mL)。在ABTS试验中,最好的三个姜科植物组合的抗氧化活性顺序为:9:1草果-红豆蔻(IC50:0.34±0.01 mg/mL)>9:1草果-阳春砂仁(IC50:0.34±0.02 mg/mL)>7:3草果-阳春砂仁(IC50:0.38±0.01 mg/mL)。3.体外模拟消化结果显示,草果乙醇提取物在DPPH模型中,当胃消化时间为3.0 h时,IC50值最低为1.12±0.09 mg/mL,当肠消化时间为4.0 h时,IC50值最低为0.57±0.04 mg/mL;在ABTS模型中,当胃消化时间为3.0 h时,IC50值最低为1.11±0.03 mg/mL,当肠消化时间为3.0 h时,IC50值最低为0.80±0.00mg/mL。且草果乙醇提取物的抗氧化活性在体外消化后仍优于阳春砂仁、红豆蔻、小豆蔻。结论1.微波辅助提取法提取时间短、所需溶剂少、操作简单,验证试验结果表明,响应面法优化的草果黄酮提取工艺合理可行。2.草果乙醇提取物与阳春砂仁、红豆蔻、小豆蔻乙醇提取物之间均具有一定的抗氧化协同作用,3种姜科植物可以增强草果乙醇提取物DPPH+自由基和ABTS+自由基清除活性能力。3.草果乙醇提取物模拟胃消化最佳时间为3.0 h,模拟肠消化最佳时间为3.0h,而且草果乙醇提取物在模拟体外消化后的抗氧化活性优于其他三种姜科植物。
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