桑椹多糖的提取纯化及抗氧化活性初步研究

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桑椹为一种药食两用的水果,作为食品,其营养丰富,味甘甜;作为中药材,其药理作用受到许多人的开发与研究,具有滋阴补血、清热生津、延年益寿的功效,治疗失眠、便秘、耳鸣、须发早白等症状。而多糖是其中可以发挥重要作用的一种活性成分,是经过多个单糖脱水缩合而成的聚合物,具有抗氧化、降血脂血糖以及抗炎活性等。本论文以桑椹鲜果为实验对象,对其多糖进行提取分离、纯化以及结构鉴定。运用超声波提取桑椹多糖的响应面实验设计,从而达到优化提取工艺的目的,通过优化条件,提取到大量桑椹粗多糖样品,然后对桑椹粗多糖进行分离纯化,对其单糖组成进行了定性及定量研究,而后对纯化的几种桑椹多糖进行体外抗氧化研究。为桑椹功能成分提取分离鉴定和桑椹产品标志性成分检测提供参考,从而为桑椹多糖的进一步研究开发奠定一定的理论和实践基础。实验结果如下:  (1)通过单因素试验,选取最适合的条件对桑椹粗多糖进行响应面的工艺优化设计,不同因素对于桑椹多糖提取率的影响程度强弱为:浸提温度>超声时间>水料比>超声功率,确定了优化的桑椹多糖提取工艺参数:浸提温度为72℃,超声功率为106W,超声时间为48 min,水料比为42∶1(mL/g),在此条件下,桑椹多糖提取率达到8.41%。超声提取后得到的粗多糖为分离纯化的样品。  (2)通过透析去除蛋白质和小分子物质,而后得到的桑椹粗多糖经纤维素DEAE-52柱层析,通过蒸馏水、0.2mol/l、0.3mol/lNaCL洗脱后得到相对称的洗脱峰,分别对其进行浓缩,冻干,并分别命名为MBP-1、MBP-2、MBP-3。对MBP-2进行高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定多糖MBP-2是一种杂多糖,1.2171×105Da平均分子量。再将多糖MBP-2进行傅立叶变换红外光谱(FTIR)分析它是典型的糖类物质,研究了它的主要官能团组成,吸收峰主要在3411、2926、1639、1415和1080cm-1,分别代表-OH、-CHZ-、-CHO、-COOH、C-O-H。GC-MS单糖组成结果表明,MBP-2主要是由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成的杂多糖,其摩尔比为:鼠李糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=0.6∶0.1∶0.066∶0.05∶0.207∶1.034。  (3)桑椹多糖MBP、MBP-1、MBP-2、MBP-3不仅对于DPPH·、羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O2·-)有一定清除能力,而且有一定的还原力和螯合金属离子的能力。而且伴随着质量浓度的增加,桑椹多糖在一定的范围内,表现出来良好的量效关系。  由上可见,桑椹中含有一定的多糖,是一种多功效成分并存的优良的食物资源,具有良好的开发前景。综合利用桑椹,提高桑椹的经济附加值,开发更多的桑椹功能食品意义非凡。
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