论文部分内容阅读
本论文研究了莱克多巴胺，沙丁胺醇，克伦特罗三合一免疫亲和柱的制备方法，并对洗脱条件进行了优化，柱性能进行了测试，最终确定了最优的使用条件，同时，将其与常用的酶联免疫法，固相萃取小柱净化-高效液相色谱检测，固相萃取小柱净化-高效液相色谱串联质谱检测进行比较。首先，将莱克多巴胺抗体和克伦特罗抗体偶联到CNBr活化的琼脂糖凝胶中，并制成免疫亲和柱，进行洗脱条件的优化及柱性能的测试。结果表明：该免疫亲和柱对莱克多巴胺、沙丁胺醇、克伦特罗的柱容量依次是49ng/ml胶、27ng/ml胶、24ng/ml胶。最佳洗脱液是3ml甲醇，保质期是5个月，最适PH为7-8，它还可耐受甲醇含量低于25%的甲醇水溶液以及乙腈含量低于20%的乙腈水溶液。然后，介绍了四种同步检测瘦肉精的方法。酶联免疫法(ELISA)：适合大批量的检测，耗时比较短，检测限是10ng/g。固相萃取小柱净化和高效液相色谱检测的联用：该法回收率在72.96%-112.48%之间，RSD%均小于10%，缺点是灵敏度不高。固相萃取小柱净化和高效液相色谱-串联质谱检测联用：研究了PCX小柱和MCX小柱对三种物质的回收率差异，结果显示两种柱子对三种物质的回收率保持了一致性。三种瘦肉精的平均回收率在54.88%-101.4%之间，总体相对偏差(RSD)均低于3%，检测限是1.3-2ng/g，很灵敏，但是这种方法的检测费用比较昂贵。免疫亲和柱净化和高效液相串联质谱检测联用：该免疫亲和柱对三种物质的回收率在78.90%-104.00%之间，RSD%皆小于2%，检测限是0.1-1ng/g。结果显示，免疫亲和柱净化和高效液相色谱串联质谱检测的方法，和其他三种方法比较具有检测重现性好，比较灵敏，回收率较高的特点。但是，该法也有缺陷，成本高，必须低温保存，保质期短等等，值得进一步研究。