目的:蛋白磷酸酶2A(Protein phosphatase 2A,PP2A)在细胞周期的调控过程中扮演着重要的角色。我们在前期的研究中发现PP2A抑制剂—斑蝥素(cantharidin,CAN)和冈田酸(okadaic acid,OA),可阻滞胰腺癌细胞周期于G2/M期,并通过JNK(c-Jun N-terminal kinase)信号通路依赖性机制抑制胰腺癌细胞生长。本研究拟证实PP2A抑制剂诱导G2/M期阻滞,以及通过JNK通路介导的细胞杀伤作用所涉及的详细信号通路转导机制,为将PP2A抑制剂进一步应用于胰腺癌的治疗供理论基础。方法:1、应用MTT(methyl thiazolyl tetrazolium,噻唑蓝)法检测细胞生长2、应用流式细胞术检测细胞周期3、应用基因芯片(Microarray)、定量PCR检测目的基因mRNA表达;应用Western blot检测目的基因蛋白表达4、应用信号通路抑制剂或siRNA干扰研究信号通路转导机制5、应用荧光素酶报告基因检测目的基因启动子活性6、应用染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)检测转录因子与靶DNA的结合结果:1、PP2A抑制剂通过JNK信号通路依赖性机制诱导胰腺癌细胞G2/M周期阻滞,并抑制胰腺癌细胞生长。2、PP2A抑制剂通过JNK信号通路抑制CDK1,进而抑制细胞周期由G2期向M期转换,从而抑制胰腺癌细胞生长。3、PP2A抑制剂通过JNK信号通路激活转录因子Sp1,Sp1通过结合CDK1转录起始位点上游-382bp~-372bp转录调控元件,抑制CDK1的转录。结论:PP2A抑制剂通过PP2A/JNK/Sp1/CDK1信号通路诱导胰腺癌细胞G2/M周期阻滞,从而抑制胰腺癌细胞生长。