病毒性丙型肝炎是一种严重危害人类健康的传染性疾病。聚乙二醇干扰素联合利巴韦林治疗丙型肝炎应答率大约是70%,但复发率较高,部分病人对治疗无应答,它们的副作用很大,人们迫切希望找到更有效的治疗方法。随着小干涉RNA(siRNA)技术的进步,应用RNA干涉(RNAi)对一些病毒感染性疾病如HIV感染的治疗研究取得一系列成功,把这一技术用于丙型肝炎的基因治疗,是一种值得探索的治疗丙型肝炎的手段。本研究构建了HCV NS5A真核表达质粒,建立了HCV NS5A在人肝细胞株HL-7702细胞中复制和表达系统,使其成为我们所设计的特异性siRNA抑制丙肝病毒复制的模型。设计构建针对HCV NS5A区中3个不同靶点的表达siRNA质粒,转染可表达HCV NS5A的HL-7702细胞,检测对HCV NS5A蛋白表达的影响,并测定它们的干涉效应。结果表明:特异性siRNA在细胞内显著抑制HCV的蛋白表达,抑制作用从第4天开始,具有序列特异性和高度选择性,且对细胞无毒性作用。本研究是特异性siRNA首次在细胞水平上针对HCV的NS5A复制子进行的研究,目前国内外尚未见报道,为进一步的体内实验和临床使用提供了重要的理论基础、技术路线和实验方法。