宫颈癌是威胁女性生命健康的第二大杀手,却也是至今病因明确的唯一癌症。超过99%的宫颈癌与人乳头状瘤病毒(HPV)的感染有因果关系。因此,对HPV感染情况的筛查成为重要而有效的预防宫颈癌的早期筛查手段。但是HPV的不同亚型的致病风险程度及其在不同地域人群中的分布都有所差异,直接对HPV进行分型检测显然更具有实际意义和价值。然而,目前仍然缺乏灵敏且经济适用的分型方法。宫颈癌的发展不仅仅是HPV感染的结果,还是因其影响导致宿主细胞中发生一系列基因及其表达功能改变的结果。研究这些改变并找到关键的癌变相关标志物,例如基因或蛋白,不仅有利于印证宫颈癌的筛查效果,也为治疗宫颈癌的治疗提供了新的目标。因此,本课题研究了可用于宫颈癌筛查的HPV分型方法并探索了宫颈癌变的可能标志物,研究成果在宫颈癌的早期诊断上具有实际应用价值,为宫颈癌的治疗提供新的可能。第一章综述了HPV与宫颈癌的相关背景,介绍了HPV分型检测的方法,论述了其优缺点。详述了HPV影响致癌的主要分子机制,由此引出本文选用标志物的可能性猜想,并对其进行了初步验证。在最后,提出了本文的思路和研究方案。第二章建立了基于聚合酶链式反应(PCR),限制性片段长度多态性(RFLP)分析结合芯片电泳(MCE)的方法对HPV进行分型。以47种HPV类型为对象,与细胞学检查和DNA测序方法对比,考察了其在宫颈脱落细胞样品中的检测效果。结果显示阳性检出率是传统的细胞形态学检查的4倍,检测出单一感染占2/3,共测出11种HPV类型,分型准确度大于90%。证明了 PCR-RFLP-MCE自动分型方法的优越性以及用于辅助宫颈癌早期诊断的HPV筛查的可能性。第三章初步验证了所选标志物的变化规律。选取HIF-1α及c-myc为目标癌变标志物,猜想了 HIF-1α与c-myc在宫颈癌细胞中的相互作用方式,利用基因启动子上游存在能形成G-四联体序列的特征,研究了HIF-1αα,c-myc,p21和VEGF的基因表达变化。采用G-四联体配体化合物TMPyP4刺激,获得基本与预测相符的结果,即HIF-1α,c-myc,VEGF表达均下降,p21表达增加,细胞周期停滞在G1期。以上结果为进一步研究监测标志物变化和基因治疗的靶标奠定了基础。最后,论文对本研究课题进行了总结,并对所建立的HPV分型方法的更广泛应用以及癌变标志物的应用和在基因治疗上的前景进行了预测和展望。