乳制品已成为人们日常饮食中的重要组成部分,为了使乳制品具有不同的生理活性,通常在乳中加入乳酸菌,所以乳酸菌及适合乳酸菌生长的基础培养基成为研究的热点,适宜的基础培养基应该具有能够提供菌体生长必需的营养成分、来源广泛、价格低廉、细胞产率高等特点。利用海藻生产生物柴油后的废弃物中含有大量的碳水化合物和蛋白质,而且产量大,来源广,价格低,所以选择这种廉价又营养丰富的物质作为乳酸菌发酵的底物,通过营养强化,改变发酵条件,以及酸解、酶解或者酸解酶解共同作用处理海藻残渣,从而促进植物乳杆菌09004和保加利亚乳杆菌ATCC 11842在海藻残渣中的增殖。对海藻残渣的营养成分进行分析,凯氏定氮法测得海藻残渣的蛋白质含量为15.32%±0.22%;索氏抽提法测得粗脂肪的含量为36.6%±0.51%;高效液相色谱法测定糖组成,海藻糖含量为0.27%±0.04%、葡萄糖含量为0.08%±0.01%、半乳糖含量为0.06%±0.007%、阿拉伯糖含量为0.0085%±0.0007%;氨基酸分析仪测定海藻残渣中总氨基酸含量为12.26%;直接滴定法测得淀粉含量为17.17%±0.05%。保加利亚乳杆菌ATCC 11842在37℃发酵MRS培养基,最大活菌数可以达到2.86×107CFU/m L,在37℃发酵2%(w/v)海藻残渣,最大活菌数可以达到1.60×107CFU/m L。对海藻残渣培养基进行营养强化,分别研究在2%(w/v)海藻残渣中添加5种维生素(泛酸、核黄素、生物素、盐酸吡哆辛、烟酰胺),添加氨基酸(胱氨酸、谷氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸),添加葡萄糖(添加量为1%,2%,5%),添加蛋白胨(添加量为0.25%,0.5%,1%),通过生长曲线、p H变化、乳酸产量的对比,结果表明:添加维生素和氨基酸可以显著促进保加利亚乳杆菌ATCC11842的增殖(p<0.05),显著提高乳酸产量(p<0.05);添加1%(w/v)和2%(w/v)葡萄糖活菌数显著高于添加4%(w/v)葡萄糖(p<0.05),添加2%(w/v)葡萄糖乳酸产量最高,因此选择2%(w/v)葡萄糖添加量与不同的蛋白胨添加量复配;添加0.5%(w/v)的蛋白胨活菌数显著高于添加0.25%(w/v)和1%(w/v)蛋白胨(p<0.05),添加0.5%(w/v)和1%(w/v)蛋白胨乳酸产量显著高于添加0.25%(w/v)蛋白胨(p<0.05);然后用葡萄糖和蛋白胨复配,结果表明:1%(w/v)蛋白胨和2%(w/v)葡萄糖的复配添加量可以显著促进保加利亚乳杆菌ATCC 11842的增殖(p<0.05)。研究不同的发酵温度、不同的发酵酸度对保加利亚乳杆菌ATCC 11842发酵海藻残渣的影响,结果表明,37℃,p H=6.5最有利于保加利亚乳杆菌ATCC 11842发酵海藻残渣。用85%的偏磷酸水解,α-淀粉酶水解,以及偏磷酸和α-淀粉酶协同作用对海藻残渣进行预处理,发现偏磷酸和α-淀粉酶协同作用最有利于促进保加利亚乳杆菌ATCC 11842发酵海藻残渣的增殖。植物乳杆菌09004在37℃发酵MRS培养基,最大活菌数可以达到2.56×109CFU/m L,在37℃发酵2%(w/v)海藻残渣,最大活菌数是1.08×108CFU/m L。对海藻残渣培养基进行营养强化,分别研究在2%(w/v)海藻残渣中添加5种维生素(泛酸、核黄素、生物素、盐酸吡哆辛、烟酰胺),添加氨基酸(胱氨酸、谷氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸),添加葡萄糖(添加量为1%,2%,5%),添加蛋白胨(添加量为0.25%,0.5%,1%),通过生长曲线、p H变化、乳酸产量的对比,结果表明:添加维生素和氨基酸可以显著促进植物乳杆菌09004的增殖(p<0.05),显著提高乳酸产量(p<0.05);添加2%(w/v)葡萄糖活菌数显著高于添加1%(w/v)和4%(w/v)葡萄糖(p<0.05),乳酸产量没有显著差异,因此选择2%(w/v)葡萄糖添加量与不同的蛋白胨添加量复配;添加0.5%(w/v)的蛋白胨活菌数和乳酸产量都显著高于添加0.25%(w/v)和1%(w/v)蛋白胨(p<0.05);然后用葡萄糖和蛋白胨复配,结果表明:1%(w/v)蛋白胨和2%(w/v)葡萄糖的复配添加量可以显著促进植物乳杆菌09004的增殖(p<0.05)。研究不同的发酵温度、不同的发酵酸度对植物乳杆菌09004发酵海藻残渣的影响,结果表明:37℃,p H=6.5最有利于植物乳杆菌09004发酵海藻残渣。用85%的偏磷酸水解,α-淀粉酶水解,以及偏磷酸和α-淀粉酶协同作用对海藻残渣进行预处理,发现偏磷酸和α-淀粉酶协同作用最有利于促进植物乳杆菌09004发酵海藻残渣的增殖。经过以上的研究表明,在ACM中添加1%蛋白胨和2%(w/v)葡萄糖,植物乳杆菌09004和保加利亚乳杆菌ATCC 11842的活菌数可以达到最大。保加利亚乳杆菌ATCC 11842的活菌数为2.45×107CFU/m L,植物乳杆菌09004的活菌数可以达到8.00×108CFU/m L。