罗非鱼皮、鱼磷、鱼尾的高效利用研究

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罗非鱼是我国目前养殖量最大的淡水鱼,加工过程中产生大量的副产物——鱼头、鱼鳞、鱼尾、鱼皮等,其中鱼皮、鱼鳞、鱼尾占了相当大的比例。本研究以海南罗非鱼皮、鱼鳞、鱼尾为原料,采用不同的方法,研究了鱼皮、鱼鳞、鱼尾的高效利用途径,以期为丰富鱼皮、鱼鳞、鱼尾的应用领域,开发高附加值产品提供理论依据。具体工作如下:1罗非鱼皮原料特征及胶原蛋白的提取以罗非鱼皮为原料,分析测定了其中胶原蛋白含量,并在4℃条件下利用酸法或酶促酸法提取胶原蛋白。结果表明:罗非鱼皮中粗蛋白含量高达32.68%(以湿基计),胶原蛋白含量为26.91%,约占其粗蛋白质量的82.31%,说明罗非鱼皮中含有丰富的胶原蛋白。酸促酶法提取的胶原蛋白中甘氨酸数占总氨基残基的35.79%,每1000总氨基残基中亚氨基酸——脯氨酸和羟脯氨酸分别为25.48%、15.20%。酸法提取的胶原蛋白在232nm处有强吸收峰,符合Ⅰ型胶原蛋白的特征。2罗非鱼皮色素的提取分离及其抗氧化作用以清除DPPH自由基能力为指标,研究了罗非鱼皮色素抗氧化成分的提取、分离纯化方法和抗氧化性能。结果表明,用柠檬酸预处理鱼皮,以甲醇为溶剂提取鱼皮色素提取率及其对DPPH自由基的清除率最高。在树脂吸附分离过程中,鱼皮色素在40min内达到吸附平衡;吸附效率随样品浓度的增大而降低;丙酮洗脱鱼皮色素的解吸率最高;洗脱时间在20min内达到解吸平衡;洗脱料液比为1:2(mL/mL)时效果最优;上样流速在0.10-0.20mL/min范围内吸附效率达85%以上;解吸速度在0.15~0.40mL/min范围内解吸效率可以达到90%以上。鱼皮色素经树脂分离后,清除DPPH自由基的能力显著提高。X-5树脂对色素活性成分具有较强的吸附分离能力,有望应用于鱼皮色素中天然抗氧化成分的分离纯化。3不同交联剂交联胶原支架的制备及性能表征为了提高胶原蛋白的物理化学性能,采用1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、EDC/EGCG三种交联剂分别对胶原进行交联,以收缩温度、吸水率、抗酶解能力、形态学变化为评价指标对胶原交联前后的性能进行表征。结果表明,胶原经交联后,热稳定、形态稳定性增强,抗酶解的能力显著增加,且用EGCG交联后的胶原支架的抗酶解能力明显强于EDC交联的胶原支架,说明了EDC、EGCG、EDC/EGCG交联均能有效改善胶原的物理化学性能。4吸附表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)鱼鳞材料的制备及性能研究采用罗非鱼鳞为原料,研究了EGCG吸附材料的制备方法,简明了吸附机理,优化了吸附工艺。结果表明,EGCG吸附材料的制备工艺为:温度110℃,pH值7,料液比(g/mL)1:6,时间20min,颗粒大小0.30-0.45mm,此条件下制备的鱼鳞材料对EGCG的吸附量达23.53mg/g;鱼鳞吸附EGCG是灰分与蛋白共同作用的结果,灰分与蛋白比例为1.08:1时吸附量最大;静态实验表明,鱼鳞吸附EGCG在40min内达到吸附平衡,吸附率随样品浓度的增大而降低;50%乙醇洗脱EGCG的解吸率最高,洗脱时间在100min时达到解吸平衡,洗脱料液比1:28(g/mL)时效果最优,解吸2次效果最佳。此材料对EGCG具有较强的吸附和分离能力,有望应用于EGCG的分离纯化。5鱼尾色素中类胡萝卜素的提取、鉴定、抗氧化性及稳定性的测定以罗非鱼尾为原料,优化了色素中类胡萝卜素的提取工艺,并对其组分进行鉴定,同时对其抗氧化性与稳定性进行了研究。以提取率和DPPH自由基清除率为评价指标,采用溶剂浸提的方法对色素中类胡萝卜素进行提取。结果表明,鱼尾色素中类胡萝卜素提取的较佳工艺为浸提溶剂无水乙醇、温度20℃、料液比(g/mL)1:5、时间24h、浸提1次;此时色素提取物的提取率达2.40%,DPPH自由基清除率为58.44%。通过颜色反应、紫外光谱、Rf测定对色素进行分析鉴定,证实了色素提取物的主要成分是类胡萝卜素,薄层层析结果表明,类胡萝卜素中主要含有的5种组分,Rf值分别为0.303、0.578、0.627、0.675、0.902。利用DPPH法、ABTS法和铁氰化钾还原法对类胡萝卜素进行抗氧化实验。结果表明,鱼尾色素中类胡萝卜素具有较强的清除DPPH自由基和ABTS自由基能力,其IC50值为0.3891mg/mL和1.8654mg/mL。还原力测定试验也得出相似的结果。考察了温度、金属离子、HC1、NaOH、光照和H202、Vc和常用食品添加剂对类胡萝卜素稳定性的影响。结果表明:较高温度(>60℃)以及Ag+、Cu2+、Fe2+、Fe3+、Al3+对色素具有较大程度的破坏作用。类胡萝卜素在低浓度HCl(<0.01mol/L)下稳定性较好,高浓度HC1(>0.01mol/L)或NaOH条件下易发生变化。不同来源的光源对类胡萝卜素的破坏程度为:太阳光>紫外灯>日光灯>室内光>暗处。此外,类胡萝卜素具有一定的耐氧化性,当高浓度H202(>1%)存在时,色素易发生降解。6鱼尾胶原蛋白的提取与鉴定采用罗非鱼尾为原料,研究鱼尾脂溶性色素的去除方法及胶原蛋白的提取工艺,并测定了胶原蛋白纯度,鉴定了胶原蛋白类型。结果表明,去除色素的最佳方案为混合溶剂氯仿:甲醇:水=1:2:0.8、料液比1:15(g/mL)、时间36h,此条件下色素去除率达鱼尾湿质量的2.85%;正交试验确定胶原蛋白提取的最佳工艺为盐酸胍浓度3mo1/L、胃蛋白酶添加量3.0%(w/w)、时间72h、料液比1:50(g/mL)、提取次数2次,此条件下胶原蛋白提取率达鱼尾湿质量的4.96%,占鱼尾粗蛋白含量的40.39%:提取物中胶原蛋白含量达94.63%,且显示Ⅰ型胶原蛋白的特征。
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