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目的:探讨微管蛋白折叠辅助因子B(Tubulin folding cofactors B,TBCB)在胎儿酒精综合症(Fetal alcohol syndrome,FAS)发病机制中的作用。从TBCB对微管生物合成及动态平衡调节的角度入手,探讨FAS的发病机制。方法:建立胎儿酒精综合症小鼠模型,在其发育过程中,通过行为学检测,明确其神经系统的损伤症状。用Nissl、Golgi染色,检测P0新生小鼠大脑内神经元及树突棘数量、纤维轴突长度的变化;用透射电镜检测神经元胞体及纤维内部超微结构的改变;免疫荧光(Immμnofloμrescent,IF)、免疫印迹(Western Blot,WB)检测大脑内神经元标记物Neu N、树突标记物Map2、轴突标记物Smi、微管蛋白α-Tμblin及TBCB的表达变化,明确神经元、微管与TBCB的表达改变。定量逆转录PCR(Qμantitative Reverse Transcription PCR,q RT-PCR)检测TBCB的m RNA表达改变。结果:与正常小鼠比较,FAS新生鼠出生体重显著降低,解剖观察神经系统发育无明显异常。在其发育过程中,行为学检测显示,FAS小鼠的本体感觉与运动协调能力的发育显著延迟,对新事物的探索能力降低,学习记忆能力明显下降。对新生鼠大脑神经元数量进行检测,Nissl、Golgi染色结果显示,FAS小鼠神经元数量与对照组无明显差异。对新生鼠大脑神经元胞体形态、结构进行检测,透射电镜发现FAS新生鼠大部分神经元的胞体、胞核的形态结构,以及细胞器的数量、形态结构均无明显异常。对新生鼠神经纤维形态结构进行检测,IF、WB显示FAS小鼠脑内轴突、树突标记物Smi、Map2的表达明显降低;电镜结果显示FAS新生鼠大脑皮质神经纤维纵切面内,平行排列的细长管状的微管结构几乎消失,核糖体、线粒体水肿并减少,但仍可见;横截面内微管空心圆状结构消失,呈现为絮状不规整结构。对新生鼠脑内TBCB及微管进行检测,IF显示二者在FAS新生鼠大脑运动区、杏仁核,以及丘脑的表达明显降低,WB显示二者在FAS新生鼠全脑的蛋白表达明显下降,q RT-PCR显示FAS新生鼠全脑内TBCB的m RNA下调。TBCB与α-tubulin沿微管共表达,但共表达的区域及数量明显减少。结论:TBCB在FAS新生鼠脑内表达下调,可能导致微管形态结构严重破坏,从而引起神经纤维病变,最终导致FAS小鼠神经发育障碍,表现出学习、记忆、感知、感觉能力的发育迟缓。目的:大鼠脑外伤(Traμmatic Brain Injμry,TBI)及星形胶质细胞划伤后,通过对水通道蛋白-4(Aqμaporin-4,AQP4)以及肌萎缩蛋白(Dystroglycan,DG)表达变化规律的研究,探索AQP4的表达改变是否与DG有关,以及二者表达变化的调控机制。方法:SD大鼠随机分组,根据自由落体法建立TBI组及假手术组。各组于术后6 h、12 h、24 h、48 h取材。通过伊文氏蓝(Evans Blμe,EB)检测血脑屏障(blood brain barrier,BBB)的损伤程度,IF、WB检测AQP4、α-DG、β-DG的蛋白表达变化,q RT-PCR检测三者m RNA的含量变化。为了排除TBI继发因素的干扰,明确TBI后星形胶质细胞中,AQP4与DG的表达变化关系及调控机制。用SD新生鼠进行原代星形胶质细胞培养,随机分组,建立划伤及假划伤对照组模型。于划伤或假划伤后6 h、24 h分别收取细胞,IF、WB、RT-PCR检测AQP4、α-DG、β-DG的蛋白及m RNA的表达变化;WB检测ERK信号通路的改变。为了明确ERK信号通路是否参与TBI后AQP4及DG的表达调控,随机将星形胶质细胞细胞分为对照组、抑制剂组与激动剂组,分别加入DMSO、μ0126、TPA预处理1 h后进行划伤,于划伤后6 h收取细胞。IF、WB、RT-PCR检测三组细胞中AQP4与α-DG、AQP4与β-DG的蛋白及m RNA的表达变化;WB检测ERK信号通路的改变。结果:TBI后各时间段,AQP4、α、β-DG的表达变化规律虽基本一致,但由于TBI后继发的炎性反应及其它因素的干扰,使得DG与AQP4的表达变化确实存在不一致的现象;但在纯化的星形胶质细胞中,划伤后DG与AQP4的表达改变与P-ERK的变化完全一致;干扰ERK信号通路后,导致DG与AQP4的表达发生相应的改变。结论:TBI后,DG参与AQP4在星形胶质细胞的锚定,但并非AQP4极性表达的专属锚定蛋白;机械损伤后早期ERK信号通路激活,并参与DG及AQP4的表达调控。