研究目的：蜂毒素为一种分子量小、稳定性高、并具有较高生物活性的细胞毒类的药物。我们经过前期研究证明其制剂蜂毒注射液具有良好的稳定瘤体、提高免疫等作用,临床试验亦证实与化疗药物联用,可以减毒增效并显著改善临床症候,提高肿瘤患者生存质量。近几年,蜂毒素抗肿瘤作用的相关实验研究多集中于诱导凋亡及抑制血管生成方面,而对其对胃癌细胞侵袭黏附能力的影响报道较少,与化疗药物之间的协同作用的相关实验研究则未见报道。本研究旨在探讨：①蜂毒素对人胃癌细胞株BGC-823体外增殖的抑制作用；②蜂毒素体外对人胃癌细胞株BGC-823黏附及侵袭能力的影响；③蜂毒素体外对人胃癌细胞株BGC-823凋亡及细胞周期的影响；④蜂毒素体外与氟脲嘧啶、顺铂、多西紫杉醇之间的协同作用并初步探讨其作用机理。研究方法：①采用MTT法,观察不同浓度的蜂毒素体外作用胃癌细胞株BGC-823不同时间后对其增殖的影响以及不同浓度的蜂毒素对人胃癌细胞株BGC-823黏附的抑制作用；②采用细胞黏附人工重组基底膜培养小室(Transwell小室)法,观察不同浓度的蜂毒素对人胃癌细胞株BGC-823侵袭能力的影响；③运用AnnexinV/PI双染色法研究不同浓度蜂毒素对人胃癌细胞株BGC-823凋亡的诱导作用；④利用流式细胞仪检测蜂毒素对人胃癌细胞株BGC-823周期阻滞效应；⑤运用中效原理计算蜂毒素与氟尿嘧啶、顺铂、多西紫杉醇间的协同作用；⑥使用实时荧光定量PCR法检测蜂毒素联合氟尿嘧啶、顺铂、多西紫杉醇对化疗药物相关基因表达的影响。研究结果：①各个浓度的蜂毒素溶液对胃癌细胞株BGC-823均有不同程度的抑制作用,具有浓度依赖性：当药物浓度为2μg/ml作用细胞24h、48h后,其抑制率分别为5%及10%,无统计学意义；当药物浓度在32μg/ml作用细胞24h、48h后,其抑制率为54%及87%,对肿瘤细胞的增殖的抑制作用最强。蜂毒素对细胞体外增殖的抑制作用亦呈时间依赖性,各浓度下48h的抑制率均高于24h。②蜂毒素作用人胃癌细胞BGC-82324h后,细胞的黏附能力明显降低,侵袭的细胞数较对照组明显减少。③蜂毒素作用人胃癌细胞株BGC-8236h即出现明显的早期凋亡,并呈一定的浓度依赖性。④与阴性对照比较,蜂毒素作用人胃癌细胞BGC-82324h后,8μg/ml浓度以下出现G2/M期细胞比例逐渐上升,而S期的比例逐渐下降,但当蜂毒素浓度达至16μg/ml时,S期细胞比例突然明显上升G0/G1期及G2/M期比例却明显下降,Go/G1期前出现亚二倍体区。⑤协同作用方面,蜂毒素联合氟脲嘧啶、顺铂、多西紫杉醇的联合组对肿瘤细胞的抑制作用均好于单药给药组,且化疗药物相关基因的表达均明显下降。研究结论：①蜂毒素具有体外抑制人胃癌细胞株BGC-823的增殖作用。②蜂毒素有降低人胃癌细胞株BGC-823黏附及侵袭能力的作用。③蜂毒素有诱导人胃癌细胞株BGC-823凋亡的作用,并阻滞细胞周期于S期。④蜂毒素与氟尿嘧啶、顺铂、多西紫杉醇间存在一定的协同作用,其作用机制可能与下调相关基因的表达有关。