基于水杨酸型接枝微粒制备生物碱分子表面印迹材料及其分子识别与结合特性的研究

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生物碱是中草药中重要的有效成分,不同生物碱具有不同的药理活性。但从中草药中有效地提取纯化生物碱,是一项十分复杂的提取工程,通常所用的溶剂萃取分离法,效率低成本又高。本研究采用本课题组建立的新型表面印迹技术,分别制得了茶碱印迹材料与苦参碱印迹材料,并探讨了它们对模板分子的结合特性与机理,为将分子表面印迹材料应用于生物碱的分离提纯进行了探讨性研究,本文的研究结果对提升生物碱分离纯化技术水平具有重要的科学意义与价值。本文使用偶联剂γ-巯丙基三甲氧基硅烷(MPMS),对微米级硅胶微粒进行了表面化学改性,制得了表面带有巯基的改性微粒MPMS-SiO2.使改性微粒MPMS-SiO2表面的巯基与溶液中的过氧化二苯甲酰(BPO)构成氧化-还原引发体系,实现了油溶性单体甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)在硅胶微粒表面的引发接枝聚合,制得了接枝度为23g/100g的接枝微粒PGMA/SiO2,重点研究了主要因素对巯基-BPO体系引发GMA接枝聚合的影响;使接枝大分子PGMA的环氧基团与5-氨基水杨酸(SA)发生开环反应,将水杨酸基团键合在接枝大分子侧链,制得功能功能微粒SA-PGMA/SiO2,重点研究了主要因素对大分子PGMA上的环氧基团与5-氨基水杨酸(SA)发生开环反应的影响规律。比较深入地研究了功能微粒SA-PGMA/SiO2对两种生物碱的吸附性能与机理。实验结果表明,SA-PGMA/SiO2对生物碱具有强的吸附作用,吸附的驱动力是氢键及静电相互作用两种作用协同的结果。在pH=7时,SA-PGMA/SiO2对茶碱具有最大吸附量;在pH=8时,SA-PGMA/SiO2对苦参碱具有最大吸附量。温度对吸附性能也有很大的影响,升高温度将导致吸附量降低。以茶碱为模板分子,乙二醇二缩水甘油醚(EGDE)为交联剂,对接枝在硅胶表面的SA-PGMA大分子链进行了分子交联,实现了茶碱分子的表面印迹,制备了茶碱分子表面印迹材料MIP-SA-PGMA/SiO2(缩写为MIP-SAP/SiO2)。采用静态与动态两种方法研究了MIP-SAP/SiO2对茶碱的结合性能与分子识别特性。实验结果表明,印迹材料MIP-SAP/SiO2对茶碱具有特异的识别选择性与优良的结合亲和性,相对于参比物甘油茶碱,印迹之前,SA-PGMA/SiO2对茶碱的吸附选择系数仅为0.810,而印迹之后,分子印迹材料MIP-SAP/SiO2的吸附选择系数则提高至7.720。此外,茶碱印迹材料MIP-SAP/SiO2具有良好的洗脱性能。最后,以苦参碱为模板分子,乙二醇二缩水甘油醚为交联剂,在SA-PGMA/SiO2表面上的PGMA长链上的羧酸根进行交联反应,实现了苦参碱分子的表面印迹,成功地制得了苦参碱分子表面印迹材料MIP-SAP/SiO2。采用静态与动态两种方法研究MIP-SAP/SiO2对苦参碱的结合性能与分子识别特性。实验结果表明,MIP-SAP/SiO2对苦参碱分子具有特异的识别选择性与优良的结合亲和性。相对于参比物金雀花碱,SA-PGMA/SiO2对金雀花碱的识别选择系数仅为1.270,而表面印迹材料MIP-SAP/SiO2的识别选择系数则提高至11.166;相对于参比物氧化苦参碱,SA-PGMA/SiO2对苦参碱的识别选择系数仅为0.943,而表面印迹材料MIP-SAP/SiO2的识别选择系数则提高至5.659。同时苦参碱印迹材料MIP-SAP/SiO2的洗脱性能良好。
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