高血压是各类心血管疾病的主要诱因,其发病机制复杂,如何安全有效的防治高血压是当前亟待解决的问题。市售降血压药物虽然能够有效降低血压,但是存在一系列不良反应等副作用,对身体健康造成安全隐患。近年来,天然食源性血管紧张素转换酶（Angiotensin converting enzyme,ACE）抑制肽因疗效稳定、毒副作用较低、绿色可持续等优点,在医药与功能性食品领域得到广泛关注。枸杞榨油后的副产物为枸杞籽粕,蛋白质含量达到24%～30%,是丰富的植物蛋白资源,其营养价值较高,开发潜力较大。目前枸杞籽粕仅被用作饲料、肥料,或是被大量丢弃造成资源浪费。本论文以枸杞（wolfberry）籽粕为原料,提取得到枸杞籽粕蛋白,利用碱性蛋白酶水解得到酶解产物,并通过响应面法优化制备工艺,再经过鉴定合成得到枸杞籽粕ACE抑制肽,研究枸杞籽粕ACE抑制肽对人脐静脉内皮细胞造成的影响,为枸杞籽粕ACE抑制肽的研究开发提供了理论依据,主要研究结果如下:1、枸杞籽粕ACE抑制肽制备的工艺优化:以ACE抑制率和水解度为指标,首先进行单因素试验,然后在单因素基础上以ACE抑制率为指标,通过响应面优化得到了制备枸杞籽粕ACE抑制肽的最佳酶解工艺:碱性蛋白酶添加量1.42×l04U/g、超声功率122 W、酶解时间36.5 min、酶解温度50℃。在此工艺条件下,枸杞籽粕ACE抑制肽的ACE抑制率最高,为71.28±0.86%。2、五种枸杞籽粕ACE抑制肽的鉴定合成与分子对接:采用最佳工艺条件,研究枸杞籽粕蛋白酶解前后分子量分布情况,体外抗氧化活性及ACE抑制活性。利用LC-MS/MS鉴定酶解产物,得到 5 种可能的 ACE 抑制肽（AIWAIYVWCRR、ELAGEALKEGGSSEMNLK、KAIWAIYVWCRR、NSRFSCLGGSR、TLERYQK）,研究了这五种ACE抑制肽的竞争模式,与ACE的相互作用。结果表明,NSRFSCLGGSR体外抑制活性最高,其IC50值为0.68 mmol/L。NSRFSCLGGSY、AIWAIYVWCRR、KAIWAIYVWCRR对ACE的抑制均为竞争性抑制模式,TLERYQY、ELAGEALKEGGSSEMNLK对ACE的抑制均为非竞争性抑制模式。分子对接表明,五种ACE抑制肽与ACE存在相互作用,且结合良好。由此可知,通过最优工艺制备得到的枸杞籽粕ACE抑制肽具有有效的ACE抑制活性。3、枸杞籽粕ACE抑制肽的作用机理:以人脐静脉内皮细胞为模型,研究枸杞籽粕ACE抑制肽可能的抑制机制。通过分析细胞内NO释放量和ROS 水平,并从分子水平与蛋白水平研究抑制肽对细胞的影响。结果表明枸杞籽粕ACE抑制肽可能通过增加NO释放量,降低ROS水平达到降压目的。荧光定量PCR与蛋白质免疫印迹结果显示,细胞经ACE抑制肽处理后,其ACE、ET-1表达下调,eNOs表达上调。