【摘 要】
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本课题的研究成功地实现了电化学免疫阵列传感器快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7。利用巯基物质在金表面的自组装特性,在金阵列上形成稳定、有序、紧密的,尾基为羧基的16-巯
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本课题的研究成功地实现了电化学免疫阵列传感器快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7。利用巯基物质在金表面的自组装特性,在金阵列上形成稳定、有序、紧密的,尾基为羧基的16-巯基十六烷酸(MHDA)自组装膜(Self-assembled Monolayers,SAMs);通过1-乙基-3-(3-二甲基氨丙酸)碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)的活化作用在电极表面形成活性酯中间体,使抗体更有效的固定到SAMs上;因抗原抗体的特异性结合,将大肠杆菌O157:H7捕获到电极上,进行电化学测量,从而实现了对细菌的定量检测。 在存在铁氰化钾/亚铁氰化钾氧化还原对的缓冲溶液中,测量电极各步处理结果的循环伏安曲线和电化学阻抗谱。循环伏安曲线可用来定性的分析电极表面的修饰状况以及修饰层的稳定性。根据电化学阻抗谱良好的界面表征特性,选取合适的等效电路对阻抗谱进行分析。相对常相位角元件,电子转移电阻的改变最明显,增幅最大。从而可以确定,免疫传感器的修饰以及大肠杆菌的固定主要影响了电子转移电阻。通过分析电子转移电阻在不同浓度菌液中响应的变化,实现对浓度的定量分析。检测过程中金电极阵列的使用,给多样本检测节省了时间。该免疫传感器的检测下限可达到2.0×10~2 CFU/ml,检测线性范围为2.0×10~2～2.0×10~7 CFU/ml。单个样本的检测时间仅需65分钟。
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