论文部分内容阅读
背景与目的抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎(Anti–N-methyl-D-aspartate ReceptorEncephalitis)是一种自身免疫性中枢神经系统感染性疾病,可伴或不伴卵巢畸胎瘤;隶属副肿瘤性疾病范畴。临床上可有前驱期,出现持续不规律高热、头痛、流感样症状;明显的精神症状,包括焦虑,激越,行为怪异,幻觉,妄想,思维混乱,失眠,语言障碍及厌食或摄食过度表现;记忆力下降、意识水平下降、癫痫发作、运动功能障碍和自主神经功能紊乱。脑电图可呈特异性“δ刷”,脑脊液或血清抗NMDAR抗体检测被认为是诊断该疾病的特异性抗体。抗NMDA受体脑炎可发病于任何年龄,以儿童和女性多见;女性发病的中位数年龄为23岁,而卵巢畸胎瘤的检出与年龄具有相关性,大于18岁女性56%有单侧或双侧卵巢畸胎瘤,而小于14岁的女孩则只有不到9%;临床数据证实早期治疗有效,早期诊断、早期免疫抑制剂治疗以及伴肿瘤患者施行肿瘤切除对疾病的预后是积极的。但是该脑炎发病机制未明,目前无确诊“金标准”,且该疾病临床表现个体异质性较大,诊断较困难,临床症状范围广,具有潜在的致死风险。因此需要进一步研究,寻找确诊该疾病的稳定、准确率高、灵敏性高的诊断标志物。MicroRNAs (miRNAs)是一类高保守性、非编码dxRNA分子,长度约22个核苷酸,通过与靶基因3’端非翻译区(3’.UTR)的不完全碱基配对导致靶mRNA降解或翻译抑制,从而在真核生物中对基因表达起着负调控作用。循环中MicroRNAs被包裹在外泌体、微小体或凋亡小体中,这些膜性结构对MicroRNAs起有效的保护作用。另外对于MicroRNAs的化学修饰、与蛋白分子或脂质的结合也使得MicroRNAs具有抵抗RNase的能力,这些都提示MicroRNAs成为一种潜在性诊断标志物。因此探讨抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎患者血浆中MicroRNAs差异表达变化,寻找具有统计学意义的MicroRNA,并依此为主线研究可能存在的作为辅助抗NMDA受体脑炎诊断的潜在的诊断标志物。方法实验分2部分。(1)应用微阵列基因芯片技术检测抗NMDA受体脑炎患者和健康人血浆MicroRNAs的表达水平;筛选出具有统计学意义的差异表达的MicroRNAs;(2)根据基因芯片结果、文献资料,选择MicroRNA-140作为评价指标,收集不同颅内感染患者血浆,分为4组:健康人组、抗NMDA受体脑炎患者组结核性脑(膜)炎患者组、病毒性脑(膜)炎患者组,通过实时定量PCR方法检测各组血浆MicroRNA-140的表达水平。结果1.芯片结果共筛选出140个与抗NMDA受体脑炎相关的差异表达miRNAs基因(P<0.01):53个表达上调,87个表达下调。其中MicroRNA-140表达在抗NMDA受体脑炎中表达下调5倍以上(|log2|=5.11,P=0.004);2.血浆MicroRNA-140的表达水平在抗NMDA受体脑炎患者组中显著低于结核性脑(膜)炎患者组、病毒性脑(膜)炎患者组、健康人组(P<0.05);结核性脑(膜)炎患者组、病毒性脑(膜)炎患者组、健康人组相比,血浆中MicroRNA-140水平下调差异无统计学意义(P>0.05)。结论1.抗NMDA受体脑炎患者血浆中MicroRNA-140表达水平下降.2.MicroRNA-140在抗NMDAR脑炎血浆中特异性表达变化可能作为检测潜在生物标志物。