大白菜花药和游离小孢子培养比较研究

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大白菜(Brassica campestris L. ssp. pekinensis Olsson)原产中国,是我国的重要蔬菜作物。在大白菜育种领域,国内外已普遍开展了各种生物技术在育种上的应用研究。目前,在新品种选育工作中,育种工作者普遍反映花药和游离小孢子培养技术是能有效利用的方法之一。本实验对大白菜的花药和游离小孢子培养方法进行比较分析。一方面,结合现有的研究成果,对影响培养效果的各因子进行验证研究,选择最合适培养方法和条件参数。另一方面,对利用花药和游离小孢子培养技术在育种工作中的实际应用效果进行比较,分析两种方法的各自优缺点,为其改进方法以及提高在育种中的实际应用效率而提供参考依据。主要研究结果如下: (1)品种间基因型差异是影响大白菜花粉胚诱导的关键因素之一。品种不同,胚诱导效率差异很大。结果还表明,高代亲本与F1品种的胚胎发生能力没有明显差异。 (2)花药培养和游离小孢子培养有相同趋势。高温预处理可以大大提高花粉胚的诱导效率。预处理温度均以33℃的效果最好。高温预处理的最佳时间一般在24~48h之间。 (3)增加有机成分含量对大白菜花粉胚的诱导具有明显的促进作用。降低无机成分含量则不利于花粉胚诱导。花药培养的培养基蔗糖浓度以10%的处理水平诱导效果最好,而游离小孢子培养则以13%的处理水平诱导效果最好。激素则均以不加激素的处理效果最好。 (4)花药培养的花粉胚植株再生率要明显高于游离小孢子培养。而每花蕾成苗数则游离小孢子培养略高于花药培养。 (5)大白菜游离小孢子培养的花粉胚诱导效率比花药培养约高十倍,而游离小孢子培养产生的花粉胚的植株再生率则明显低于花药培养。但从每花蕾的成苗数来看,游离小孢子培养略高于花药培养。游离小孢子培养的技术难度、操作要求和应用成本均要高于花药培养,所以游离小抱子培养需要进一步提高在植株再生等关键环节上的效率才能使之更广泛地应用于实际育种工作中。
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