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研究背景与目的:临床和基础研究均证实,摄入过量果糖会引发高尿酸血症、高甘油三酯血症、胰岛素抵抗、高血压以及系统性炎症等代谢综合征,并损伤肝肾组织。传统经典方五苓散由猪等、茯苓、泽泻、肉桂及炒白术组成,具有利尿、改善肾功能等功效,用于治疗小便不利、水肿引起的肾炎等病症。现代研究表明五苓散具有降尿酸、改善胰岛素抵抗和脂质代谢紊乱、及抗炎等作用,呈现出防治相关代谢性疾病的潜力,但其作用机制仍需探索。因此,本文主要研究五苓散对果糖代谢综合征小鼠肝肾损伤的保护作用,并初步探索其作用机制。研究方法:雄性ICR小鼠每天饮用30%果糖水6 ml,6周后分别给予水、五苓散(987、1316、1755和2340 mg/kg)以及阳性对照药物别嘌呤醇(5 mg/kg),持续6周,在此期间每天给予果糖水。商品试剂盒方法测定血清及24 h尿液中尿酸、肌酐和血尿素氮等水平。酶法测定血清及肝脏组织中甘油三酯、总胆固醇等水平。口服葡萄糖耐受量试验(OGTT)评价小鼠胰岛素抵抗状态。用无创血压仪测定小鼠尾动脉收缩压。ELISA法测定小鼠血清、肝肾组织中促炎性细胞因子白介素-1β(IL-1β)以及血清胰岛素浓度。苏木精-伊红染色(HE)法观察小鼠肾组织和肝组织病理变化。油红O染色法观察肝组织脂质沉积。Western blotting方法检测肾皮质中尿酸盐转运子1(URAT1)、葡萄糖转运子9(GLUT9)、ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)、有机阴离子转运子1(OAT1)、有机阳离子转运子1(OCT1)和OCT2、Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子(MyD88)、转录因子κB(NF-κB)信号、丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)以及NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)炎症小体NLRP3、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)等蛋白表达水平。Western blotting方法检测肝脏c-Jun氨基端激酶(JNK)/胰岛素受体底物1(IRS1)/蛋白激酶B(Akt)信号通路、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)、NF-κB信号通路以及NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平。研究结果:五苓散能显著降低果糖代谢综合征小鼠血清尿酸、肌酐和尿素氮水平,提高其尿酸排泄分数,降低收缩压、血清甘油三酯、胰岛素和IL-1β浓度,同时改善葡萄糖耐量。五苓散可逆转果糖诱导动物肾脏URAT1和GLUT9蛋白表达的升高及ABCG2、OAT1、OCT1和OCT2蛋白表达的降低。同时发现五苓散可明显减轻果糖代谢综合征小鼠肾间质炎细胞浸润。进一步研究发现五苓散可显著抑制模型动物肾脏TLR4/MyD88信号、NF-κB信号与MAPKs通路的激活。另外,五苓散能抑制果糖代谢综合征小鼠肾脏NLRP3炎症小体的激活和IL-1β生成。与此同时,五苓散显著降低果糖代谢综合征小鼠肝脏IL-1β和甘油三酯水平,减轻肝细胞炎性浸润和脂质沉积。五苓散可调节模型动物肝脏JNK/IRS1/Akt信号通路、减少SREBP-1c、FAS和SCD1蛋白表达水平,抑制NF-κB通路和NLRP3炎症小体的激活,以降低肝脏IL-1β水平。结论:本文研究结果表明,五苓散可改善果糖引起小鼠代谢综合征,并通过调节模型动物肾脏有机离子转运子蛋白的表达而发挥其降尿酸和肾保护作用,其作用机制也可能与其抑制TLR4/MyD88信号和NLRP3炎症小体的激活及降低IL-1β水平等有关。另外,五苓散改善了果糖代谢综合征小鼠肝脏甘油三酯堆积与炎症,其作用机制可能与其调节肝脏胰岛素信号传导、降低SREBP-1c、FAS和SCD1蛋白表达、抑制NF-κB通路和NLRP3炎症小体的激活有关。本研究初步揭示了五苓散对果糖代谢综合征小鼠肝肾组织炎症损伤的保护机制,为其临床防治代谢性紊乱疾病肝肾组织损伤提供科学依据。