极端嗜盐古菌嗜盐菌素C8的分离纯化和基因克隆

来源 :中国海洋大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:chaosum
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为了进一步在蛋白和基因表达水平上对嗜盐菌素的多样性进行研究,该文对22株极端嗜盐古菌进行了产嗜盐菌素的筛选.抑菌实验发现,在22株极端嗜盐古菌中,有21株可以产生嗜盐菌素;只有1株(Halobacterium sp.QD3)不产嗜盐菌素.其中,有6个嗜盐菌素(Hal C6、Hal C8、Hacl C9、Hal C16、Hal C17、Hal C22)抑菌谱比较广,可以抑制大多数(≥10)极端嗜盐古菌的生长.对这6个嗜盐菌素分析进行理化性质的测定,发现Hal C8性质非常稳定,是研究嗜盐菌素的理想材料.根据嗜盐菌素C8的N端氨基酸序列设计了一对简并引物(C8-2,C8-4),利用这对引物从AS7092的总DNA中扩增出halC8的部分序列.将这段PCR产物克隆到T-载体上,形成质粒pLY11,测序结果表明PCR产物所编码的氨基酸是与Hal C8成熟蛋白的N端氨基酸序列是一致的.
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