槐糖脂对水果致腐菌的抗菌作用及新型防腐保鲜剂的开发

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致腐菌是诱发水果采后腐烂,造成水果在贮运期间腐败变质的主要原因。在我国,由于缺乏必要的冷贮设备,水果采后病害的防治主要采用杀菌剂,尤其是化学杀菌剂。但长期大量使用化学杀菌剂会对人体健康及环境造成危害,同时使水果致腐菌产生抗药性,进一步加剧水果腐烂。因此迫切需要寻找一种有效而对人类无害的新型杀菌剂来取代传统的化学杀菌剂。槐糖脂是一类由酵母菌产生的糖脂类生物表面活性剂,由科学家Spencer在1954年首次发现。由于其具有无毒、生物可降解、环境友好等优点,在石油工业、环境保护、食品、化妆品、洗涤剂及医药等方面展示了良好的应用前景。近年来,对槐糖脂作为药物的研究已有许多文献报道,其中包括了槐糖脂的抑菌作用。但是,经文献和专利检索,槐糖脂在水果腐烂防治中的研究和开发未见报道。本研究从腐烂的水果分离鉴定致腐菌入手,研究了槐糖脂对水果致腐菌的抑制作用及其对果蔬的保鲜作用,并对槐糖脂抑菌机理进行了初步探讨,为新型水果防腐保鲜剂的开发提供了依据。本文主要研究内容和结果如下:1.槐糖脂发酵工艺条件的优化。确定槐糖脂发酵培养基不变的情况下,即葡萄糖8%,蛋白胨2%,酵母膏0.3%, KH2PO4 0.1%,Na2HPO4·12H2O 0.1%,MgSO4·7H2O 0.05%,菜籽油8%,通过预先在种子液中加入3.0%的菜籽油,可以缩短发酵周期36 h;将发酵液中8%的菜籽油分批加入,即初始加入4.0%,待发酵进行至72 h时再补加剩余4.0%菜籽油,最终槐糖脂得率达到43.40±1.0 g/L,比一次性加入得率提高4.0 g/L左右。同时研究还发现,溶氧是槐糖脂大规模发酵的关键影响因素。2.果蔬致腐菌的分离鉴定。从腐烂水果上分离得到17株菌,感染实验证明其中9株可以导致水果腐烂,对这9株菌进行了显微观察,结合常见真菌的形态特征对其进行了简单分类,与文献报道的引发水果病害的微生物基本相同,大部分致腐微生物为霉菌,另外有少数酵母菌。3.槐糖脂对致腐菌的抑制及其机理。槐糖脂对分离到的9株致腐菌均有良好的抑制性。槐糖脂浓度为0.5 g L-1时几乎完全抑制酵母菌的生长,对霉菌的抑菌率也在60%左右。2.0 g L-1时对霉菌抑菌率超过80%。同时研究还发现槐糖脂对霉菌菌丝以及空气中的微生物有良好的抑制作用,3.0 g L-1的槐糖脂可以抑制95%以上的空气中的微生物,其对菌丝蔓延抑制率也超过70%;同时,槐糖脂还可以抑制和推迟菌丝产生孢子。对槐糖脂的抑菌机理进行研究,初步阐明槐糖脂的抑菌机理为槐糖脂破坏致腐菌细胞壁,使细胞裂解死亡。4.槐糖脂对水果的保鲜作用。槐糖脂对苹果、梨、柑橘、红果、黄瓜、西红柿、冬枣等均有一定的保鲜效果,3.0 g/L的槐糖脂涂膜处理水果,室温放置7天,可以降低失重率6%-10%以上;而以失重15%来判定,槐糖脂处理的果蔬室温放置可以延长3-6天。推测槐糖脂保鲜机理是由于其分子亲油端进入果蔬表皮蜡质层,从而使得亲水端长链暴露在空中,起到保湿效果。5.槐糖脂保鲜杀菌剂的剂型。将槐糖脂按其最大溶解度30 mg/mL溶解于乙醇中,将其与吐温80和水按照4:1:5到5:1:4配比即得到保鲜剂的原液,密封保存,使用时稀释适当倍数即可,该配型所选取的溶剂和乳化剂均无毒无害,可以直接应用于果蔬采后保鲜和田间喷施。将槐糖脂按其最大溶解度170 mg/mL溶解于二甲基亚砜中,将其与吐温80和水按照2:1:7到3:1:6配比即得到杀菌剂原液,使用时稀释适当倍数即可,该配型选取的溶剂二甲基亚砜本身有一定的抑菌作用,但二甲基亚砜低毒性,可以用于田间喷雾杀菌,不适宜直接用于果蔬采后保鲜。
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