镉在小飞扬草各组织器官积累机理研究

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小飞扬草(Euphorbia thymifolia L.)是Cd的超积累植物。本研究采用化学分析、差速离心技术、透射电子显微镜-X射线能谱技术从器官和细胞的水平研究Cd的分布特征;利用逐步提取、高效液相色谱法、X射线衍射技术研究Cd在小飞扬草各器官中的结合形态。从Cd在小飞扬草中的分布特征和形态差异,探讨小飞扬草超积累Cd的机制。取得的主要成果如下:(1)10mg/L、20mg/L和40mg/L Cd浓度处理条件下,Cd在小飞扬草的根、茎、叶三个器官中平均可达到51.64、65.61、24.53mg/kg,茎对镉的积累作用显著高于根、叶,对镉的积累作用大小:茎>根>叶。(2)5mg/L和10mg/L Cd浓度处理下,在小飞扬草根、茎、叶中,细胞壁和细胞膜是Cd主要的结合场所,含量分别占总量的47.1%49.0%、39.7%41.4%、42.9%56.2%,其次是胞液组分,含量分别占37.5%41.4%、28.2%40.7%、35.2%46.8%,细胞器组分中Cd含量较少,仅占11.6%13.5%、19.7%30.5%、8.6%10.4%。(3)10mg/L Cd浓度处理下,小飞扬草根、叶细胞中的线粒体、叶绿体、高尔基体、细胞核等细胞器结构未受损害。根、叶细胞中的细胞壁和液泡中观察到黑色沉积,能谱分析显示,Cd的含量较高,质量分数为0.340.64%。根细胞中细胞质、线粒体中的未检出Cd。而在叶细胞中的细胞质、叶绿体Cd含量分别为0.67%、0.28%。(4)Cd在小飞扬草根、茎、叶中均以氯化钠提取态为主,含量分别占70.5%84.8%、72.4%83.0%、50.0%74.8%。根部各提取态含量依次为CNaCl>CHAC>CEtOH>CHCl>CW>CR,茎、叶中各提取态含量依次为CNaCl>CHCl>CHAC>CEtOH>CW>CR。小飞扬草中Cd主要是以果胶酸盐、蛋白质结合态或吸附态的形态存在,其次是以草酸盐、磷酸盐、氨基酸盐、有机酸盐的形态存在。(5)小飞扬草的根部各有机酸含量情况为:草酸>苹果酸>丁二酸>柠檬酸。在茎中,各有机酸含量情况为:草酸>丁二酸>苹果酸>柠檬酸。叶片中,各有机酸含量情况为:草酸>苹果酸>丁二酸>柠檬酸。茎中有机酸平均含量显著高于根和叶。根中草酸含量与镉积累量呈显著正相关,相关系数为0.926;茎中苹果酸的含量与镉积累量呈显著负相关,相关系数为-0.901;叶中草酸含量与镉积累量呈显著负相关,相关系数为-0.779。(6)在对照组中,根茎叶的物相组分以纤维素为主。在处理组中,除了大量纤维素,还出现晶体衍射峰,其中根部鉴别出谷氨酸、酒石酸镉水合物、磷酸镉等物质。茎部鉴别出苹果酸镉水合物、磷酸镉等物质。叶片中鉴别出谷氨酸、苹果酸镉水合物、酒石酸镉水合物、磷酸镉盐等物质。(7)在小飞扬草中,Cd与细胞壁和细胞膜中的果胶酸和蛋白质等物质结合固定,而进入细胞的Cd大部分与有机酸络合而隔离于液泡内,这可能是小飞扬草忍耐并超积累Cd的机制。
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