六味地黄丸对绝经后骨质疏松症肾阴虚证相关基因CLCF1蛋白质表达的影响

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目的:本课题在前期研究的基础上,运用六昧地黄丸治疗POP肾阴虚证,并应用Western Blot技术检测无骨质疏松症的绝经后妇女、POP肾阴虚证治疗前、POP肾阴虚证治疗后的相关基因CLCF1蛋白质表达水平。运用统计学方法比较不同组间在相关基因CLCF1蛋白质表达上的变化,并结合中医症候疗效评分,旨在论证CLCF1与POP肾阴虚证之间的关系,阐述POP的遗传机制。为后续研究绝经后骨质疏松症肾阴虚证的基因组学机制奠定基础。方法:随机选择福州地区绝经后骨质疏松症受试者,通过问卷调查和中医辨证分型筛选出POP肾阴虚证受试者39例作为实验组,另外随机选择无骨质疏松症的绝经后妇女35例作为正常对照组。用双能X线骨密度仪(Dual energy X-ray bone mineral density testing DXA)检测所有受试者正位腰椎(L2-4)、左侧股骨颈、大转子及Ward’s区等部位的骨密度。接受六味地黄丸治疗的POP肾阴虚证受试者有28例,以3个月为一个疗程,予两个疗程药物。第一个疗程后脱落2例,共完成26例;第二个疗程后脱落3例,共完成23例。用Western Blot技术分别检测无骨质疏松症的绝经后妇女、POP肾阴虚证受试者、POP肾阴虚证受试者治疗3个月后及POP肾阴虚证受试者治疗6个月后的相关基因CLCF1蛋白质表达水平。最后,SPSS16.0统计分析,比较各组CLCF1蛋白质表达水平。结果:1.POP肾阴虚证受试者CLCF1蛋白质表达(0.479±0.169)较无骨质疏松症的绝经后妇女CLCF1蛋白质表达(0.678±0.253)显著下降,有非常显著性差异(P<0.01)。2.28例接受六味地黄丸治疗的POP肾阴虚证受试者,治疗3个月后脱落2例,共完成26例,通过中医症候疗效评分,有效者20例,有效率76.92%;无效者6例,无效率23.08%。治疗6个月后脱落3例,共完成23例,通过中医症候疗效评分,显效者4例,占17.39%,有效者16例,占69.57%,总有效率86.96;无效者3例,无效率13.04%。POP肾阴虚证治疗6个月后与治疗前不同部位的骨密度值比较,治疗后的POP肾阴虚证骨密度值呈上升趋势,尤以大转子和word’s三角区骨密度增高明显,有显著性差异(P<0.05)。3.POP肾阴虚证治疗3个月后CLCF1蛋白质表达(0.589±0.366)与治疗前CLCF1蛋白质表达(0.475±0.158)比较,无显著性差异(P>0.05),但CLCF1蛋白质表达呈上升趋势。POP肾阴虚证治疗6个月后CLCF1蛋白质表达(0.662±0.254)与治疗前CLCF1蛋白质表达(0.450±0.153)比较,有非常显著性差异(P<0.01)。POP肾阴虚证6个月后的CLCF1蛋白质表达(0.662±0.254)与无骨质疏松症的绝经后妇女CLCF1蛋白质表达(0.678±0.253)比较,无显著性差异(P>0.05),两组数值几乎在同一水平。结论:通过Western Blot技术比较各组在相关基因CLCF1蛋白质表达,POP肾阴虚证组与无骨质疏松症的绝经后妇女对照组比较,CLCF1表达水平显著下调(P<0.01);六味地黄丸治疗POP肾阴虚证6个月后与治疗前比较,CLCF1表达水平显著上调(P<0.01);表明POP肾阴虚证与CLCF1蛋白质表达下调关联,这与前期研究POP肾阴虚证CLCF1 mRNA表达情况一致。同时“以药测证”表明六味地黄丸治疗POP肾阴虚证有效。进一步证实:绝经后骨质疏松症肾阴虚证与CLCF1表达下调相关联,六味地黄丸治疗POP肾阴虚证有效。
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