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1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin)是桑叶中的一种哌啶生物碱,其化学名称是3,4,5-三羟基- 2-羟甲基四氢吡啶,分子式为C6H13NO4,分子量为163。DNJ作为α-葡萄糖苷酶的抑制剂,具有降血糖、抗病毒、抗肿瘤转移等作用。另外,DNJ还是α-葡萄糖淀粉酶的有效抑止剂。本试验利用DNJ与糖类的相似性,按照常用的用气相色谱法测定糖类物质进行的衍生化方式,将DNJ的羟基进行乙酰化反应,探索用毛细管柱气相色谱法测定桑叶中DNJ的含量,并比较了陕西省蚕桑丝绸研究所品种桑园中种植的110个桑品种不同时期采集叶片中DNJ含量的高低。结果表明,用毛细管柱气相色谱法测定桑叶中的DNJ含量是可取的,不同品种不同采集时间的桑叶样品中DNJ的含量有一定差别。本实验考察了不同溶剂和不同提取方式对桑叶中DNJ提取的影响,选用甲醇、蒸馏水、吡啶等不同试剂对DNJ进行提取,提取方式分别尝试了震荡、加热、超声提取。最终确定用吡啶作为提取试剂在超声波条件下处理30分钟为毛细管气相色谱法测定DNJ的最佳提取条件。同时考察了衍生化条件对该试验的影响,考察内容包括衍生化试剂、衍生化时间、衍生化温度等内容。最终确定在用醋酸苷作为乙酰化试剂,盐酸羟胺作为催化剂,在水浴90℃条件下乙酰化30分钟为最佳衍生化条件。本试验还考察了不同色谱条件对DNJ测定的影响,考察内容包括色谱柱选择、柱温、载气流量进样方式等。最终确定色谱条件为:色谱柱OV-1701,初温285℃×5min,以10℃/min上升至295℃,维持25min,以20℃/min下降至285℃;汽化室温度310℃;检测口温度310℃;氢气流量47mL/min;进样量1μL,火焰离子检测器(FID),色谱分析软件采用GCsolution岛津气相色谱工作站。本试验采用标准曲线法计算DNJ含量,该法具有简化重复操作,避免系统误差等优点。试验及计算后得到标准曲线方程y=36435x+17225,R2=0.9921。最低检测浓度为0.01μg/mL。加样回收率试验结果平均回收率为96.11%,RSD=3.24%(n=5)。重复性试验结果RSD=2.10%(n=5)。稳定性试验结果表明:标样及样品在24小时内基本稳定,RSD分别为1.00%和2.56%(n=5)。用所建立的毛细管柱气相色谱法对陕西省蚕桑丝绸研究所品种桑园中110个桑品种桑叶中DNJ含量进行了测定。并比较了不同品种在霜前和霜后DNJ含量的高低,结果显示,110种桑叶中均含有DNJ。其9月底(霜前)含量在0.059%～0.535%之间,11月初(霜后)含量在0.001%～0.180%之间,同时表明下霜对桑叶中DNJ含量有较大影响,绝大多数桑叶中DNJ含量在霜后降低。