【摘 要】
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BMP6（Bone Morphogenetic Protein 6）是BMP蛋白家族中的一个重要成员,其C端TGF-β结构域保守,而N端前肽结构域性序列差异较大,这种差异的生物学意义尚未明确。BMPs作为一类转化生长因子β（TGF-β）超家族成员参与调控多种生理过程,包括胚胎发育,骨形成,铁代谢及癌症发生等。通过过表达BMP6前肽对其功能进行探究,我们发现与全长BMP6功能相反,斑马鱼和人BMP6
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BMP6（Bone Morphogenetic Protein 6）是BMP蛋白家族中的一个重要成员,其C端TGF-β结构域保守,而N端前肽结构域性序列差异较大,这种差异的生物学意义尚未明确。BMPs作为一类转化生长因子β（TGF-β）超家族成员参与调控多种生理过程,包括胚胎发育,骨形成,铁代谢及癌症发生等。通过过表达BMP6前肽对其功能进行探究,我们发现与全长BMP6功能相反,斑马鱼和人BMP6前肽均抑制成骨细胞分化。通过Western blot检测,我们发现人BMP6前肽N端有一个切点,斑马鱼的BMP6前肽N端存在两个切点,并且确定了切点的位置及序列。通过对切点序列进行比较,我们发现斑马鱼BMP6前肽中第一个切点与人BMP6前肽的切点序列相同（本文称为C1）,斑马鱼BMP6前肽的第二个切点是其特有的（本文称为C2）。通过蛋白质谱分析,我们首次鉴定出与斑马鱼BMP6前肽互作的蛋白SKP1和BMP5。通过GST-pull down实验,证明了SKP1和BMP5通过斑马鱼BMP6前肽中C2切点所在序列与其互作。通过敲低SKP1对其功能进行探究,我们发现成熟BMP6蛋白的促成骨分化活性依赖于SKP1的切割调控。通过敲低BMP5对其功能进行探究,我们发现斑马鱼BMP6的促成骨分化活性依赖于BMP5。此外,基于已被报道的BMP家族在癌症发生及维持铁稳态过程中的作用,我们探究了人BMP6前肽与癌细胞增殖以及铁死亡的关系。通过过表达人BMP6前肽并进行RT-PCR实验,证明了BMP6前肽通过Ras信号通路促进肺癌细胞A549及骨肉瘤细胞MG63增殖;人BMP6前肽显著上调铁代谢关键调控基因HAMP表达,但对铁死亡相关基因的表达无显著影响。
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